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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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silentstorm

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求问,western曝出黑片会有哪些原因?

封闭时间应该足够(36h了吧),转膜封闭一抗二抗后TBST洗三次,每次5分钟
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silentstorm

铁虫 (初入文坛)

ps:5%的胶,一抗是多克隆抗体
2楼2012-03-10 16:09:48
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qjy_134

铜虫 (小有名气)


一抗和二抗的浓度降低一点试试
3楼2012-03-10 17:30:59
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冰晶幽情

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
胶片提前被曝光了
4楼2012-03-12 10:01:14
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donovanzhang

银虫 (小有名气)

曝光时间这些条件呢?
5楼2012-03-12 16:20:02
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zrtpaopao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-03-13 09:45:59
如果整张片子都黑了,那是不是胶片已经曝光了你不知道。如果只有和膜一般大小的地方全黑,那是不是一抗或二抗加太多了,或曝光时间太长了?
6楼2012-03-12 16:52:43
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silentstorm

铁虫 (初入文坛)

谢谢虫友们啦,大概是我一抗二抗之类的没洗干净,后来摇的猛些了,条带就出来的,不过背景还是很脏。我发现做大蛋白就要摇狠些,小蛋白就得轻一点(要不出白片),不知道为啥,pvdf膜孔径的问题?
7楼2012-03-25 22:15:50
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