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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求问，western曝出黑片会有哪些原因？
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silentstorm

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求问，western曝出黑片会有哪些原因？

封闭时间应该足够（36h了吧)，转膜封闭一抗二抗后TBST洗三次，每次5分钟
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1楼 2012-03-10 16:02:14
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silentstorm

铁虫 (初入文坛)
ps：5%的胶，一抗是多克隆抗体
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2楼2012-03-10 16:09:48
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qjy_134

铜虫 (小有名气)
一抗和二抗的浓度降低一点试试
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3楼2012-03-10 17:30:59
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冰晶幽情

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶片提前被曝光了
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4楼2012-03-12 10:01:14
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donovanzhang

银虫 (小有名气)
曝光时间这些条件呢？
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5楼2012-03-12 16:20:02
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zrtpaopao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+1): 鼓励应助 2012-03-13 09:45:59
如果整张片子都黑了，那是不是胶片已经曝光了你不知道。如果只有和膜一般大小的地方全黑，那是不是一抗或二抗加太多了，或曝光时间太长了？
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6楼2012-03-12 16:52:43
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silentstorm

铁虫 (初入文坛)
谢谢虫友们啦，大概是我一抗二抗之类的没洗干净，后来摇的猛些了，条带就出来的，不过背景还是很脏。我发现做大蛋白就要摇狠些，小蛋白就得轻一点（要不出白片），不知道为啥，pvdf膜孔径的问题？
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7楼2012-03-25 22:15:50
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