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jamy1989
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信号分子
现在从链霉菌中表达出了一种调控蛋白并提纯了,通过验证这种调控蛋白能和基因 D结合,结合后能调节该菌株次级代谢产物的产生,但这种结合必须是在加培养液上清的条件下!所以上清中必然存在着某种信号分子,那么,现在要找到这种信号分子有什么好的方法吗?
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1楼
2012-03-10 10:37:29
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jamy1989
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6楼
:
Originally posted by
凌波丽
at 2012-05-18 12:09:04:
这实际上是在搜索某种功能分子,甚至不知道其为生物大分子,还是有机或无机小分子。基本方法就是两个:比对和高通量。
比对,就是想法确定目的调控蛋白能和基因 D不结合的培养基与结合时的成分不同之处,你可以逐 ...
“就是想法确定目的调控蛋白能和基因 D不结合的培养基与结合时的成分不同之处,你可以逐一去掉培养基有关成分试一试”这个问题 的话不是用培养基就能解决的吧?因为验证蛋白质和DNA结合试验是通过凝胶阻滞(EMSA)来实现的!第二种“高通量”的话,因为这个信号分子本身就是很微观的东西!很难提取出来!可能是一个多肽,可能是一些无机离子等....可否有别的方法呢?
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12楼
2012-05-19 18:49:22
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西瓜
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2012-03-17 14:35:23
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2012-03-17 15:13:15
貌似不好弄,要不然血清的成分应该早就搞清了吧。
这个信号分子是不是应该很小,把上清液的层份是不是先分析下,如果东西少的话还好,东西太多就不好搞吧。
蛋白质相互作用的一系列东西能用在这里么?
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3楼
2012-03-17 14:56:16
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jamy1989
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3楼
:
Originally posted by
a731705125
at 2012-03-17 14:56:16:
貌似不好弄,要不然血清的成分应该早就搞清了吧。
这个信号分子是不是应该很小,把上清液的层份是不是先分析下,如果东西少的话还好,东西太多就不好搞吧。
蛋白质相互作用的一系列东西能用在这里么?
肯定很小啊!上清的成分光化合物就有一百多种,加上蛋白和多肽更多了,想想可不可以用分子生物学的手段来得到??!!!
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4楼
2012-03-17 21:59:09
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