24小时热门版块排行榜    

查看: 6546  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

thestormcong

银虫 (小有名气)

[求助] pkd46质粒

请问含有pkd46质粒的菌株在含有氨苄培养基,42度过夜能生长吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyacinth326

金虫 (正式写手)


西瓜(金币+1): 鼓励应助! 2012-03-06 10:36:34
pKD46在大肠杆菌中,37度过夜就会丢失的,42度只需要半个小时,加大菌体量是可以提到质粒的
7楼2012-03-05 14:13:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

fwks3518

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): Good! 2012-03-06 10:34:59
pkd46是温度敏感性质粒,在42度不复制,理论上会丢失。
2楼2012-03-04 09:15:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thestormcong

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by fwks3518 at 2012-03-04 09:15:01:
pkd46是温度敏感性质粒,在42度不复制,理论上会丢失。

好的。谢谢。想请问下,我把质粒转化到我的宿主中,挑取阳性克隆,可是就是提取不到质粒,据说这个质粒拷贝数低,不好提,所以我现在就不知道我的质粒是否真的已经导入到宿主中了。师兄能不能给点经验。谢谢。
3楼2012-03-04 10:39:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

srlee

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-03-05 11:03:55
thestormcong(金币+4): 有帮助 2012-03-05 13:06:13
1)pKD46中含有Temperature sensitive replication 元件,是温敏型质粒,在37---42℃培养条件下质粒容易丢失。
2)pKD46是low copy质粒,其质粒我提过,加大一点菌体量提质粒还是很明显的,大约在6.3kb左右。
3)一般情况下,含有pKD46质粒的大肠杆菌在30℃培养以及诱导制备感受态,再转化你要敲除的质粒,然后放在37℃培养可以去除掉pKD46质粒!
祝实验顺利!
4楼2012-03-04 15:53:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +15 吃吃吃才有意义 2026-03-19 16/800 2026-03-24 19:51 by 了了了了。。
[考研] 085602 289分求调剂 +5 WWW西西弗斯 2026-03-24 5/250 2026-03-24 18:51 by jhhcooi
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
请填处理意见