24小时热门版块排行榜    

查看: 6542  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

thestormcong

银虫 (小有名气)

[求助] pkd46质粒

请问含有pkd46质粒的菌株在含有氨苄培养基,42度过夜能生长吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fwks3518

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
thestormcong(金币+6): ★★★很有帮助 谢谢!这是个不错的方法。 2012-03-05 13:06:00
pkd46的序列在NCBI可以查到,可以设计检测特异引物来快速鉴定其存在。
6楼2012-03-05 10:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

fwks3518

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): Good! 2012-03-06 10:34:59
pkd46是温度敏感性质粒,在42度不复制,理论上会丢失。
2楼2012-03-04 09:15:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thestormcong

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by fwks3518 at 2012-03-04 09:15:01:
pkd46是温度敏感性质粒,在42度不复制,理论上会丢失。

好的。谢谢。想请问下,我把质粒转化到我的宿主中,挑取阳性克隆,可是就是提取不到质粒,据说这个质粒拷贝数低,不好提,所以我现在就不知道我的质粒是否真的已经导入到宿主中了。师兄能不能给点经验。谢谢。
3楼2012-03-04 10:39:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

srlee

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-03-05 11:03:55
thestormcong(金币+4): 有帮助 2012-03-05 13:06:13
1)pKD46中含有Temperature sensitive replication 元件,是温敏型质粒,在37---42℃培养条件下质粒容易丢失。
2)pKD46是low copy质粒,其质粒我提过,加大一点菌体量提质粒还是很明显的,大约在6.3kb左右。
3)一般情况下,含有pKD46质粒的大肠杆菌在30℃培养以及诱导制备感受态,再转化你要敲除的质粒,然后放在37℃培养可以去除掉pKD46质粒!
祝实验顺利!
4楼2012-03-04 15:53:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学学硕求调剂 +6 小羊睡着了? 2026-03-23 9/450 2026-03-24 20:21 by 小羊睡着了?
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 086003食品工程求调剂 +4 淼淼111 2026-03-24 4/200 2026-03-24 11:53 by 544594351
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +4 cccchenso 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:00 by 徐ckkk
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
信息提示
请填处理意见