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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家做酶切或者逆转录时pcr仪盖子温度设为多少？
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yuan2085

铁虫 (初入文坛)

[交流] 大家做酶切或者逆转录时pcr仪盖子温度设为多少？ 已有8人参与

我这里的pcr仪，默认是105°，但我觉得太高了，我做酶切的时候反应温度为37°，盖子设为多少度好呢？现在设了50度，高了还是低了呢？
大家指教一下。
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whb21

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1楼 2012-02-29 14:41:54
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
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西瓜: 同感…… 2012-02-29 18:21:38
楼主太奢侈了，用PCR仪做酶切啊
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2楼2012-02-29 16:03:19
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whb21

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
设置成37度就应该可以，我做反转录是这么做的 ，酶切没试过...
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3楼2012-02-29 16:29:35
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weilson

铁虫 (初入文坛)
★
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1949stone: 可以设置的 2012-02-29 18:45:02
PCR仪器的盖子温度需要设定吗？ 我用宝生物的仪器，只设置反应温度就可以了啊，上面盖子的温度是仪器预热温度？无所谓多少度吧？ 不知道是不是我理解的这样
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4楼2012-02-29 16:30:26
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eagle00768

木虫 (小有名气)
★
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西瓜(金币+1): 鼓励交流 2012-02-29 18:21:56
1949stone: 一般不会 2012-02-29 18:45:27
为什么不用水浴或者金属浴什么的呢？PCR仪温度比较稳定？anyway，盖子温度低的话，你管子里面的东西会不会容易挥发了？
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5楼2012-02-29 16:32:48
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eagle00768

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by weilson at 2012-02-29 16:30:26:
PCR仪器的盖子温度需要设定吗？ 我用宝生物的仪器，只设置反应温度就可以了啊，上面盖子的温度是仪器预热温度？无所谓多少度吧？ 不知道是不是我理解的这样

我感觉也是这样~
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6楼2012-02-29 16:33:35
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馋猫

银虫 (小有名气)
★
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西瓜(金币+1): 严重同意！ 2012-02-29 18:22:10
太奢侈啊，老板肯定要痛心

酶切放培养箱或者水浴锅都可以
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7楼2012-02-29 17:30:54
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diaoruiying

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你就按照默认的来吧；盖子的温度对槽内的温度，没有影响
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学会忍耐和承受寂寞
8楼2012-03-01 10:00:03
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shaquila

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
大约45度左右，酶切时间长了会挥发，热盖是有好处的，呵呵～～～
如果要酶切产物比较宝贵，一般是在pcr仪酶切。。。
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9楼2012-03-01 12:21:33
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ixido

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
预设应该是105℃吧，建议楼主还是别改了。不然你改完没又改回去，然后别人用的时候发现样品挥发了，你就百口莫辩了。
不过，还是建议酶切用水浴锅，毕竟一个pcr仪那么多孔只占几个孔37度酶切还是很浪费的啊。如果需要很稳定的温度的话，推荐楼主买一个小的金属浴，酶切煮样品产物失活一应俱全。
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10楼2012-03-02 09:50:03
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