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小木虫论坛-学术科研互动平台» 学术交流区» 论文翻译 » 论文翻译求助完结子版 » 一段关于蛋白质分子量测定的翻译。。。。。。。多谢多谢
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lslsdjn

金虫 (正式写手)

[求助] 一段关于蛋白质分子量测定的翻译。。。。。。。多谢多谢

For Mr determinations, the protein samples were mixed 1:1 with 2× SDS sample buffer containing β-mercaptoethanol and boiled for 5 min before being separated by
SDS-PAGE. Prestained Mr（分子量） standards (BioRad) were run on each gel as a standard. Following electrophoresis, proteins were either visualized with Commassie Blue dye (BioRad) or transblotted to PVDF membrane (BioRad) using a transblot semidry electrophoretic transfer cell at 20V for 25–30 min. Transfers were done
using 48 mM Tris, 39 mM Gly, 0.0375% (w/v) SDS, and 12% (v/v) methanol (pH 9.2) as a transfer buffer. Immunoblots were incubated with a 1:100 dilution (diluted in 1% BSA/TBST) of PPO antiserum developed from our purified wheat bran protein.Antigens were visualized by alkaline phosphatase-conjugated goat and antimouse (Sigma) and 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate and nitro blue tetrazolium (Sigma).
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如果有来生，我想做棵草！
1楼 2012-02-24 21:09:41
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eagle00768

木虫 (小有名气)
有点错别字或者重复，将就下哈~
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5楼2012-02-25 16:46:02
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moqing1991

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

lslsdjn(金币+5, 翻译EPI+1): ★有帮助 只是给了大概意思，我想要准确的翻译 2012-02-25 11:15:33
爱与雨下(金币+1): 2012-02-25 12:25:59
对于Mr的检测，蛋白质样品与包含β-巯基乙醇的2*SDS样品缓冲液由1:1比例混合，经过SDS-PAGE分离之前煮沸5min。预先的Mr（分子量）标准是每个凝胶运行的一个标准。
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我想做个木头人
2楼2012-02-25 10:48:28
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lslsdjn

金虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by moqing1991 at 2012-02-25 10:48:28:
对于Mr的检测，蛋白质样品与包含β-巯基乙醇的2*SDS样品缓冲液由1:1比例混合，经过SDS-PAGE分离之前煮沸5min。预先的Mr（分子量）标准是每个凝胶运行的一个标准。

这个带该意思我也知道，我想要的是按原文进行翻译，不过仍然感谢！
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如果有来生，我想做棵草！
3楼2012-02-25 11:14:49
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eagle00768

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

lslsdjn(金币+10): ★★★★★最佳答案 真强！多谢！ 2012-02-25 17:11:09
为了确定蛋白的分子量大小，将蛋白样品与含β-巯基乙醇的2乘（也就是2倍）SDS缓冲液按1：1混合，煮沸5分钟，然后用SDS凝胶电泳来进行分离。预染好的分子量标准品（BioRad公司，即蛋白Marker）点在胶上作为对照。电泳后，可以用考马斯亮蓝（BioRad公司）来染蛋白进行检测或是用转膜仪在20伏电压下25-30分钟，将蛋白转印至PVDF（硝酸纤维素膜）上。转印时时所用缓冲液包含有48 mM Tris, 39 mM甘氨酸, 0.0375% (w/v) SDS, 以及 12% (v/v) 甲醇 (pH 9.2)。自我们提取的小麦糠蛋白纯化而得的PPO抗血清用1% BSA/TBST按照1：100进行稀释，进行免疫印迹孵育。抗原对应的抗体为碱性磷酸酶标记的羊抗鼠（Sigma公司）并用BCIP/NBT（Sigma公司）显色。
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4楼2012-02-25 16:44:08
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