我在做植物蛋白的羰基化实验，用的是OxyBlot protein Oxidation Detection Kit，按理说，植物组织蛋白会随着衰老时间的延长而羰基化加重，我的实验组有正常衰老的，延缓衰老的，加重衰老的，但是western出来的结果就是该加重的不加重，该轻的不轻，而且重复性不好。不知道哪里出现问题了？？？是不是我蛋白提取的不好，使得他们都不同程度的氧化羰基化呢？但是我提取液加入了巯基乙醇了，最后丙酮冲洗的时候也加有巯基乙醇。检测羰基化反应是按照说明书来的，转膜杂交都是按照一般的western方法。不知道问题出现在哪里了？请高人指教…………
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