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LeVan2008

铁虫 (初入文坛)


[交流] 蛋白羰基化测定

我在做植物蛋白的羰基化实验,用的是OxyBlot protein Oxidation Detection Kit,按理说,植物组织蛋白会随着衰老时间的延长而羰基化加重,我的实验组有正常衰老的,延缓衰老的,加重衰老的,但是western出来的结果就是该加重的不加重,该轻的不轻,而且重复性不好。不知道哪里出现问题了???是不是我蛋白提取的不好,使得他们都不同程度的氧化羰基化呢?但是我提取液加入了巯基乙醇了,最后丙酮冲洗的时候也加有巯基乙醇。检测羰基化反应是按照说明书来的,转膜杂交都是按照一般的western方法。不知道问题出现在哪里了?请高人指教…………
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