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X-gal 如何配制? 见光就很容易分解吗?
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vnini
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X-gal 如何配制? 见光就很容易分解吗?
近段时间在做蓝白斑筛选,只是知道X-gal需要避光保存,但是不是很清楚x-gal具体如何配制? 难道x-gal粉末需要在黑暗条件下称取,在黑暗条件下加入DMF吗? 希望广大虫友们可以帮帮忙! 谢谢了!
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2012-02-22 14:52:45
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vnini(金币+1): 2012-02-28 10:09:34
我们实验室没那么做也,正常状态配置的,只是每次配置好后避光放置的
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修炼ing,当虫仙……
2楼
2012-02-22 19:25:41
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vnini(金币+1): 2012-02-28 10:09:42
正常情况下不需要避光配制,配好后避光保存就好了。蓝白斑实验结果中重组后的基因会产生白色菌落,空载体才会产生蓝色菌落。是不是你重组效率太高了呀?或者是你加入的x-gal浓度太低了以至于颜色不明显?
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2012-02-23 15:36:07
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是的,阴性对照是蓝色,不过要确保你当时用的感受态是好的
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6楼
2012-02-24 09:21:15
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vnini(金币+1): 2012-02-28 10:09:55
没那么严格。称量配制的过程中没啥问题的,就是不要长时间光照就可以。放心去配。
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☆☆☆想开了,便能走出去☆☆☆
7楼
2012-02-24 11:38:41
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vnini
at 2012-02-23 13:04:01:
对实验没有影响吧? 我做的结果中没有蓝斑,不知道是不是x-gal的问题! 谢谢啦!
,x-gal正常条件下配制就好了,然后避光保存。。
至于你结果中没有蓝斑,原因很多,你的对照什么结果?
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你的能力撑不起你的野心
8楼
2012-02-24 11:54:06
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配置时不用避光,保存时要避光
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快乐奋斗,创造所有。
13楼
2012-02-25 11:25:20
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j2
at 2012-02-22 19:25:41:
我们实验室没那么做也,正常状态配置的,只是每次配置好后避光放置的
对实验没有影响吧? 我做的结果中没有蓝斑,不知道是不是x-gal的问题! 谢谢啦!
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3楼
2012-02-23 13:04:01
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若水5886
at 2012-02-23 15:36:07:
正常情况下不需要避光配制,配好后避光保存就好了。蓝白斑实验结果中重组后的基因会产生白色菌落,空载体才会产生蓝色菌落。是不是你重组效率太高了呀?或者是你加入的x-gal浓度太低了以至于颜色不明显?
x-gal的浓度我是从虫友那里找的,应该没有问题! 重组后的基因是白色菌落,阴性对照的板子上应该是蓝斑吧?
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5楼
2012-02-23 16:53:03
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你做文库吗。不做文库重不用蓝白斑,
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9楼
2012-02-24 12:47:05
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7楼
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Rick001
at 2012-02-24 11:38:41:
没那么严格。称量配制的过程中没啥问题的,就是不要长时间光照就可以。放心去配。
恩,我再换次新的x-gal试试吧! 谢啦!
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10楼
2012-02-25 10:38:11
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