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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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fair72

银虫 (小有名气)

[求助] 柱层析

各位师兄师姐,我从一天然药物中提取分离生物碱,首先进行粗分了,传统的正向硅胶柱层析,氯仿甲醇洗脱,现欲进一步细分,有Sephadex LH-20和反向C-18两种填料,请问选择哪一种更好分,并且速度快,流动相应该怎么选择呢?条件如何摸索?问的有点多,感谢了!
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fjamigo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与交流 2012-02-22 09:59:41
fair72(金币+2): 有帮助 2012-02-27 12:23:27
生物碱的差异性很大,我用过C18的反向柱,你可以试试,不过最好是能在硅胶板上跑薄层先检测一下看能否分开,确定你的洗脱体系,Sephadex LH-20这个柱子不是很熟悉但是我们实验室有用这个分过多糖的,如果第一个不行你在试试这个,
2楼2012-02-22 09:32:10
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fair72

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by fjamigo at 2012-02-22 09:32:10:
生物碱的差异性很大,我用过C18的反向柱,你可以试试,不过最好是能在硅胶板上跑薄层先检测一下看能否分开,确定你的洗脱体系,Sephadex LH-20这个柱子不是很熟悉但是我们实验室有用这个分过多糖的,如果第一个不 ...

C-18反相柱的洗脱条件一般是甲醇-水呀,这个的条件怎么摸索呀,要点反向板的话也没有,就是这个让我为难哦
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3楼2012-02-22 09:46:59
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cpulhy

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
豆哥(金币+1): 鼓励新虫 2012-02-25 10:54:12
fair72(金币+4): 有帮助 2012-02-27 12:23:41
之前你用氯仿甲醇初分过。极性应该不算很小。你要是实在不知道怎么选条件。可以试试从50%或者30%的甲醇水开始跑,逐渐加大比例。Sephadex LH-20是按分子大小分离的。如果你分离的成分,结构比较类似,分子量相差不多的话,分离效果不明显。我一般用它除色素效果比较好。
4楼2012-02-22 13:20:11
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fair72

银虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by cpulhy at 2012-02-22 13:20:11:
之前你用氯仿甲醇初分过。极性应该不算很小。你要是实在不知道怎么选条件。可以试试从50%或者30%的甲醇水开始跑,逐渐加大比例。Sephadex LH-20是按分子大小分离的。如果你分离的成分,结构比较类似,分子量相差不 ...

实验室有HPLC,它可以用来摸索反向柱层析的条件吗?谢谢
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5楼2012-02-23 08:42:38
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cpulhy

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以。操作方便一些,就是比较慢,也挺耗时间的。
6楼2012-02-24 14:15:01
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