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xufen1985

金虫 (正式写手)

[求助] 耐铬菌在培养基中加入铬就不生长了,请问是什么原因

大家好,我现在正在做微生物还原铬的实验,通过鉴定我选取的微生物为芽孢杆菌,以前我是选用LB培养基来做还原实验的,还原效果不错。但是我现在想研究碳源对微生物还原铬的影响,于是我选择了一种无机培养基—M9培养基。利用氯化铵作为氮源,葡萄糖为碳源,在不加入六价铬的时候微生物可以生长,但是当我加入铬时微生物就不生长了,我怀疑是不是我用的无机氮源有问题,是否需要换为有机氮源,但是在不引人碳源的情况下换成什么样的氮源呢?我不是微生物专业的,希望各位能给我一些意见,谢谢哦!
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好好学习、天天向上
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girlfisher

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在LB这种含复杂有机物离子培养基里,200mg/L的铬也许实际有效浓度低于25mg/L。而用离子和葡萄糖的培养基里,活性铬离子的浓度也许接近投加浓度。所以用LB做毒性试验是不合适的。
11楼2012-02-22 11:07:38
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wjf008

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857(金币+2): 鼓励交流 2012-02-20 16:53:09
氮源是基本不会有问题的。既然是耐铬菌,那么需要考虑的就是菌种纯度问题还有耐受浓度问题,浓度过高会造成菌落不生长。
2楼2012-02-20 12:14:59
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pacify

木虫 (著名写手)

zhang8826857(金币+3): 鼓励交流 2012-02-20 16:53:04
学化学的路过说点看法,可能不重要。注意到你加入的是6价铬,铬的氧化性与ph关系非常紧密。碱性环境下基本不具氧化性,但酸性越强氧化性越强。这个你可以想象洗液是用浓硫酸和重铬酸钾配的,就可以明白氧化性问题。
然后我看到你用的氮源是强酸弱碱盐,也就是酸性的,虽然在化学反应中这种ph条件不会提供强氧化环境,但生物的耐氧化性我是不知道的,应该考量一下。再者化学反应经常强调反应时间问题,有事仅仅是介于有害与无害之间,但时间长了可能结果也不好说。至于你培养细菌用多长时间我就不知道了,个人感觉时间应该相当长的。
提供两点参考,呵呵
3楼2012-02-20 12:42:40
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dgr69

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
LB培养基和M9培养基成分是不一样的,LB培养基成分主要是胰化蛋白胨和酵母提取物,氨基酸的成分比较多,而M9培养基主要成分为氯化铵和葡萄糖,成分不一样,意味着内部新陈代谢的路径不一样,铬抑制的代谢路径是固定的,但利用不同营养物质的代谢路径是不一样的,所以会造成在LB培养基中不抑制,而在M9培养基中抑制。你可以查一下相关资料,看一看氨基酸的代谢路径和葡萄糖的代谢路径有什么不同,再查一下铬主要抑制那个位点,这样可能会解决你的问题。
大山之巅
4楼2012-02-21 08:37:32
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