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chenhuize

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果用试剂盒提的话,那最好有mini nano 测一下纯度。如果纯度好的话就不用看胶图了。只要够后续试验就好了。
11楼2012-02-08 07:17:36
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weilson

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
从电泳图上来看,你的质粒是可以的。如果你上样量1μl,这样的浓度 做载体连接,已经够了。上样量体积加大,回收吧
12楼2012-02-08 10:07:19
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒电泳跑出来两条带正常,从图上看你提取的质粒浓度已经可以了,至少和marker浓度差不多,不管接下来要作转化还是别的,这样的浓度应该足可以了
13楼2012-02-08 14:46:12
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love三人游

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by whb21 at 2012-02-08 14:46:12:
质粒电泳跑出来两条带正常,从图上看你提取的质粒浓度已经可以了,至少和marker浓度差不多,不管接下来要作转化还是别的,这样的浓度应该足可以了

恩。可是我拿去测序结果总是说不能喝引物识别,我之前都是和测序引物做过PCR的啊
14楼2012-02-08 20:05:40
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lynni

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉挺好的,不过是不是都是一种,为什么跑的差好多?第六个也太多了~~
淘喜欢的一切
15楼2012-02-09 00:21:50
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love三人游

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by lynni at 2012-02-09 00:21:50:
感觉挺好的,不过是不是都是一种,为什么跑的差好多?第六个也太多了~~

都是同一个载体连得同一个目的基因。。对,我发现差好多啊
16楼2012-02-09 10:55:29
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fengbo0509

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
出现几条带主要是由于提取出的质粒结构不同。一般2-3条带都是正常的。
主要有完整的闭环,半开环和开环3种形态。操作上细微动作可能会造成不同的结果。
17楼2012-02-09 14:48:57
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chunying@

新虫 (初入文坛)

您好!我是测序公司的。跑完电泳的质粒有几条带是正常的现象,因为质粒有几种不同的形态,所以在同浓度的胶下它的迁移率是不同的。你说质粒的浓度低,那可能与您的菌液浓度、抽提的试剂等有关。其实你也可以考虑下叫测序公司给你提取质粒的,有些公司是不收取费用的。你只要提供菌液就行的。另外,如果你直接提供质粒的话,测序公司会根据你质粒的浓度决定测序时加入多少模板,所以你不必担心。
成功来自于不断的努力与激情
18楼2012-02-09 15:05:45
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whb21

木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by whb21 at 2012-02-08 14:46:12:
质粒电泳跑出来两条带正常,从图上看你提取的质粒浓度已经可以了,至少和marker浓度差不多,不管接下来要作转化还是别的,这样的浓度应该足可以了

既然你做PCR可以P的出来那就说明你的引物和质粒模板是对应的,建议你联系测序公司,让他们好好核实一下
19楼2012-02-12 08:40:37
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒提的不错了,建议先做一下没切验证,如果没问题了就去测序。
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
20楼2012-02-12 09:14:32
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