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如何验证RNA是否与蛋白质发生相互作用?
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seewindow
新虫
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专业: 兽医传染病学
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如何验证RNA是否与蛋白质发生相互作用?
如何验证某个RNA分子是否与蛋白质相互作用呢?
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1楼
2012-02-06 15:26:12
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nasi
银虫
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虫号: 1131096
注册: 2010-10-24
专业: 动物遗传学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。具体你再查查吧。不知道是否有用。祝好运。
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8楼
2012-02-07 10:50:04
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斯多格格
铜虫
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性别:
MM
专业: 环境微生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流! 2012-02-06 18:12:25
研究RNA与蛋白的相互作用一般用三杂交系技术。三杂交系统的基本原理是将一个已知的RNA结合蛋白与转录因子的DNA结合domain构建第一个融合蛋白,第二种蛋白(待选的RNA结合蛋白)与转录激活结构域构建融合蛋白。此外构建和表达一杂合RNA,含有二个不同的结合位点。当RNA与二个RNA结合蛋白的结合位点相互作用时可激活报道基因的转录和表达。报道基因表达与否来看RNA与蛋白是否发生了作用。
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书自香我何须花
2楼
2012-02-06 17:01:45
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unique133
金虫
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虫号: 539353
注册: 2008-04-04
性别: GG
专业: 植物保护生物技术
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天(金币+2): 鼓励回答 2012-02-07 10:00:56
可能是这样做
1.如果蛋白质有RNA酶的作用,直接验证RNA是否降解。(用另一个蛋白没有RNA酶活性的做一个负对照)
2.把RNA与蛋白质混合跑电泳。如果RNA与蛋白质相互作用,则影响蛋白质的迁移。
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7楼
2012-02-07 09:53:54
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niushuaiji
金虫
(正式写手)
不放弃的小鸟
BioEPI: 1
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虫号: 1217078
注册: 2011-03-01
性别: GG
专业: 临床生物化学检验
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
目前了解到的RNA的功能,酶学功能和tRNA mRNA siRNA可能会与蛋白质作用,可以试着从这些角度考虑
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Tobeornottobe,that'saproblem
9楼
2012-02-07 13:05:45
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