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arkingdom

金虫 (正式写手)

[求助] 求标准曲线中的问题:

下面是两个实验室作的标准曲线,为什么差异那么大,请给予解释。
1、精密称取在105℃干燥至恒重的芦丁对照品25 mg置50 ml量瓶中,加60%乙醇适量,微热使溶解,放冷加60%乙醇稀释至刻度,摇匀精密量取25 ml,置50 ml量瓶中,加60%乙醇稀释至刻度,摇匀,即得(1 ml中含无水芦丁0.25mg)。
    精密量取对照品溶液0.0 ml、1.0 ml、2.0 ml、3.0 ml、4.0 ml、5.0 ml分别置25 ml量瓶中,各加水至5 ml,加5%亚硝酸钠溶液1 ml,摇匀,放置6分钟,加10%硝酸铝1 ml,摇匀,放置6分钟,加4 %氢氧化钠溶液10 ml再加60%乙醇稀释至刻度,摇匀,放置15分钟。照分光光度法(中国药典2010年版一部附录ⅤA)试验,在510nm波长处测定吸收度,吸收度为纵坐标,以浓度为横坐标,绘制标准曲线。
其吸收值分别为:
C                A
0        0
0.01        0.126
0.02        0.211
0.03        0.331
0.04        0.451
0.05        0.563
2、精密称取10 mg芦丁标准品,用60 %乙醇溶解,定容至50 mL容量瓶中,得浓度为0.2 mg/mL的芦丁标准液。准确吸取芦丁标准液0、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4 mL于10 mL容量瓶中,加入5 % NaNO2溶液0.4 mL,摇匀;放置6 min后,加入10 % Al(NO3)3溶液0.4 mL,摇匀;放置6 min后,加入4 % NaOH溶液4 mL,摇匀;最后用60 %乙醇定容至10 mL,15 min后于510 nm处测定吸光值。以芦丁浓度(mg/mL)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制标准曲线,
其吸收值分别为:
C                A
0        0
0.016         0.384
0.024         0.578
0.032         0.772
0.040         0.967
0.048         1.161
问题如题,请高手给予我指点迷津。
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anran_1224

金虫 (正式写手)

不同实验室的标曲一般是不一样的,因为仪器性能不一样,楼主只需要使用一台UV测定仪制定标曲,以后一直用那台就好了
好好学习,天天向上
4楼2012-03-09 10:52:39
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查看全部 7 个回答

hybylshb

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
arkingdom(金币+2): ★★★很有帮助 2012-02-17 01:56:13
波长有没有用钬玻璃校准,有没有按中国药典2010确认吸收系数的准确度呢
奋斗
2楼2012-02-15 21:33:47
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luodi911

铁虫 (小有名气)

不同实验室不同仪器肯定标曲没法比啊,不同日期做的都可能不一样
3楼2012-03-09 10:32:26
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紫藤花雨

金虫 (小有名气)

首先你的样品制备方法就不一样,先排除你使用的仪器、容器、量具、操作方法没有问题,你可以用完全一样的样品,分别用两台仪器测定同一样品,就可以测试出是不是仪器的问题。不同仪器的差别,我也做过相似的试验,结果无显著差异。排除以上问题后,就要考虑你这个药有没有热不稳定性。我觉得主要是样品稳定性的问题。
good good srudy ,day day up.
5楼2012-03-09 15:04:42
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