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求标准曲线中的问题:
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下面是两个实验室作的标准曲线,为什么差异那么大,请给予解释。 1、精密称取在105℃干燥至恒重的芦丁对照品25 mg置50 ml量瓶中,加60%乙醇适量,微热使溶解,放冷加60%乙醇稀释至刻度,摇匀精密量取25 ml,置50 ml量瓶中,加60%乙醇稀释至刻度,摇匀,即得(1 ml中含无水芦丁0.25mg)。 精密量取对照品溶液0.0 ml、1.0 ml、2.0 ml、3.0 ml、4.0 ml、5.0 ml分别置25 ml量瓶中,各加水至5 ml,加5%亚硝酸钠溶液1 ml,摇匀,放置6分钟,加10%硝酸铝1 ml,摇匀,放置6分钟,加4 %氢氧化钠溶液10 ml再加60%乙醇稀释至刻度,摇匀,放置15分钟。照分光光度法(中国药典2010年版一部附录ⅤA)试验,在510nm波长处测定吸收度,吸收度为纵坐标,以浓度为横坐标,绘制标准曲线。 其吸收值分别为: C A 0 0 0.01 0.126 0.02 0.211 0.03 0.331 0.04 0.451 0.05 0.563 2、精密称取10 mg芦丁标准品,用60 %乙醇溶解,定容至50 mL容量瓶中,得浓度为0.2 mg/mL的芦丁标准液。准确吸取芦丁标准液0、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4 mL于10 mL容量瓶中,加入5 % NaNO2溶液0.4 mL,摇匀;放置6 min后,加入10 % Al(NO3)3溶液0.4 mL,摇匀;放置6 min后,加入4 % NaOH溶液4 mL,摇匀;最后用60 %乙醇定容至10 mL,15 min后于510 nm处测定吸光值。以芦丁浓度(mg/mL)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制标准曲线, 其吸收值分别为: C A 0 0 0.016 0.384 0.024 0.578 0.032 0.772 0.040 0.967 0.048 1.161 问题如题,请高手给予我指点迷津。 |
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