提RNA反转录后，用GAPDH和TLR进行PCR，可是GAPDH条带很亮，TLR怎么都出不来 - 医学 - 基础

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祝福

11楼2012-01-10 09:34:25

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铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:

9楼: Originally posted by julietguo at 2012-01-10 09:15:21:
我们实验室提过RNA后就直接逆转的，没有跑rRNA哎。。

逆转之前跑胶看看，很有必要，有可能降解比较厉害
gapdh能扩出来并不能代表没有降解

还有就是需要设一个阳性对照，就是你原来能扩出来的模板，如果阳性对照也扩不出来，那就可能是PCR体系的问题

12楼2012-01-10 11:04:05

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禁言 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

13楼2012-01-13 10:20:08

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铜虫 (初入文坛)

确定条件都优化好了吗？

不为失败找理由，只为成功想办法

14楼2012-02-26 21:12:26

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铜虫 (初入文坛)

你的两对primer的Tm差多少度啊

15楼2012-12-18 13:38:52

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