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qiyg

新虫 (初入文坛)

[求助] 脂质体G-50葡聚糖凝胶测定包封率的问题

本人的药物水溶性极差,在应用葡聚糖凝胶G-50测定包封率过程中,选择10%的乙腈水溶液溶解药物,上样1mL,收集洗脱液,测定游离药物洗脱曲线,但是发现收集了15份共30mL的洗脱液都没有检测到药物含量。故考虑可能由于洗脱液为水,药物析出,残留在凝胶柱上。所以想改用用氯仿:甲醇=1:1作为洗脱液,不知是否可行?会不会损伤柱子?一般文献上资料都是以缓冲液或蒸馏水为洗脱液,不知自己的想法是否可行,望有经验的虫友给予帮助,谢谢!

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23010402

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖


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豆哥(金币+1): 谢谢参与交流~~~ 2012-01-03 08:15:16
氯仿:甲醇=1:1作为洗脱液不知道从哪看到的,应该不行,会破坏脂质体,也会塌陷柱子。也不知道你装的多大的柱子,实在不行梯度洗脱下
二十年前太小,二十年后太老
2楼2012-01-02 22:19:02
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lfyAItw

银虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
leecius(金币+1): 谢谢。 2012-01-05 08:41:30
不行吧,葡聚糖凝胶G50不能用有机溶剂吧。药物水溶性极差就不该用G5O分离,应该改用LH-20吧
3楼2012-01-03 13:34:01
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luotuoci

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2012-01-04 13:48:23
改变一下,溶剂的PH值试试,好像G50不能用有机溶剂
4楼2012-01-04 11:23:37
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qiyg

新虫 (初入文坛)


leecius(金币+1): 谢谢。 2012-01-05 08:41:46
引用回帖:
: Originally posted by 23010402 at 2012-01-02 22:19:02:
氯仿:甲醇=1:1作为洗脱液不知道从哪看到的,应该不行,会破坏脂质体,也会塌陷柱子。也不知道你装的多大的柱子,实在不行梯度洗脱下

我指的是上游离药物,溶液中就没有脂质体,只要药物能洗脱下来就行。柱子塌陷了,等回复水溶液做洗脱剂不是又会恢复正常了吗?我主要是觉得游离药物暂留在柱子里会污染柱子,总要找个办法冲洗柱子。不知我的想法是否正确,希望多多指教
5楼2012-01-04 22:42:26
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yanling3083

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
洗脱的时候不能用氯仿:甲醇=1:1,这样柱子会严重脱水,就没有分离的功能了。你用完处理的时候可以用一定比例有机溶剂的水溶液来浸泡胶,可以把胶放在大容器里,加10倍体积或更多的溶剂来浸泡,将药物从胶中分离出来。
6楼2012-01-09 16:56:27
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yanling3083

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 谢谢参与讨论! 2012-01-09 23:33:58
还有就是你游离药物析出来的话也没有关系呀,你只要能把脂质体都洗脱下来,然后用包封的药量除以总药量就能算包封率了。
7楼2012-01-09 16:57:49
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