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心强我强

铜虫 (正式写手)

[求助] 薄层层析新手,请各位帮忙分析一下遇到的问题!

样品是浓缩发酵液过程中偶然得到的片状结晶体,想对其进行薄层层析来考查一下它的情况,比如经过多次除杂后是否是单体,遇到的问题分类如下,请各位帮忙分析一下:
1、悬浮液是否可以进行薄层层析,结果是否可作为参考呢?(刚开始未找到合适的溶剂将其溶解,只能将其超声后制成浑浊的悬浮液来进行薄层层析,后来才发现氢氧化钠溶液可以将其溶解);
2、对制备的悬浮液进行展开剂的摸索,甲醇、丙酮、95%乙醇跑下来看到与前沿紧挨处有严重的拖尾的斑点,其它单一溶剂(乙酸乙酯,氯仿、乙醚、正丁醇、石油醚)和混合溶剂紫外显色没有再跑出来什么东西。这能得到一些什么信息吗?
3、更奇怪的是在摸索展开剂的过程中,有些跑下来要么紫外显色什么也没有,但是在迁移的相反方向(1cm点板那个区域)紫外显色下可以看到一条紫色的线,(我肯定点板的样品跑板时并没有浸在展开剂中),要么前沿有一条紫色线,迁移相反方向区域也有一条线,好奇怪啊,啥也没跑出来,相反方向却好像有物质,如何解释这一现象呢?  
   请各位虫友解答下困惑,先谢谢啦!
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herb_fcwr

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius(金币+1): 谢谢帮助。 2011-12-26 13:04:07
心强我强(金币+5): 谢谢你的指点,有帮助! 2012-01-06 12:26:45
1.首先最好不用悬浮液点板,可将溶液过滤,不溶物再找合适的溶液点板。
2.别只用紫外显色,局限性很大,可试试其他通用显色剂,我怀疑你看到的斑点,未必是你的样品的显色。
3.在前沿或在迁移相反方向区域有一条紫色线,没什么奇怪,怀疑溶剂的问题,你用的什么板子?是否加热干燥过?只要不影响你的显色,不用去管,仅看你需要的信息。
2楼2011-12-26 08:47:01
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心强我强

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by herb_fcwr at 2011-12-26 08:47:01:
1.首先最好不用悬浮液点板,可将溶液过滤,不溶物再找合适的溶液点板。
2.别只用紫外显色,局限性很大,可试试其他通用显色剂,我怀疑你看到的斑点,未必是你的样品的显色。
3.在前沿或在迁移相反方向区域有一条 ...

你好,首先谢谢你的回答,很有帮助
1、你的意思过滤后再将用氢氧化钠将不溶物溶解后进行点板吗?(我至今发现的就是氢氧化钠溶液)
2、我用了其他的显色方法,碘显,生物碱、浓硫酸还有磷钼酸显色,并没有看到斑点,但并不是每块板都进行了这些显色操作,主要还是先看紫外显色,没有什么现象,也就没全部进行这些考察;
3、请问你怀疑溶剂什么问题?我用得时硅胶薄板,没有加热干燥,直接室温阴干了有一个星期了。如果显色效果好我也不纠结了,只怪啥也没,偏偏还往相反方向迁移,匪夷所思,找不到原因啊。
走过的路是平的,坚持自己所选择的。。。学会在暴雨中跳舞!
3楼2011-12-26 17:24:12
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