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多核现象的基因敲除
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talang123
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1楼
2011-12-22 20:32:05
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talang123
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5楼
2012-03-13 21:01:31
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susizheng
木虫
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我們是糖 甜到憂傷
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虫号: 642666
注册: 2008-11-01
性别: GG
专业: 有机合成
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看天(金币+3): 鼓励回答 2011-12-23 22:45:49
多核?是指多倍体吧。
设计过二倍体酵母的敲除,思路很简单,
正常做敲除,PCR鉴定看是敲掉了1个,还是两个都敲掉了,如果只敲除了一个,在基因两端设计引物,会扩增到两条带,一条基因条带,一条插入抗性基因条带。
然后再设计引物敲第二个,此时设计引物在第一次敲除的基础上向基因内部设计一点,两对引物的关系相当于巢式引物的关系,然后用另外一种抗性基因再敲除第二个基因。
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talang123
Thank-you,so-blue.
2楼
2011-12-23 09:28:15
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3楼
2011-12-23 13:29:17
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克隆大虾
铁杆木虫
(著名写手)
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虫号: 93868
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【答案】应助回帖
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看天(金币+2): 鼓励回答 2011-12-23 22:46:11
用孢子呗,孢子是单核的...
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4楼
2011-12-23 22:23:29
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