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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大家帮忙分析下双向电泳结果不好的原因（有图）
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hubuwzm

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by loop00 at 2012-09-06 10:20:14
真正的问题是，你的碱端聚焦不清晰，因为DTT会在电泳过程中迁移到pH7以下的位置，碱性端失去还原剂保护，无法清晰聚焦；
要解决这个问题，使用2mMTBP代替DTT（最小包装约1000元），或者在碱端加一片小滤纸，方法同 ...

你是在聚焦的盐桥上加DTT吗？加多大浓度的啊？
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11楼2012-12-20 17:31:33
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我的海宝lzy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zjkown at 2011-12-22 06:44:19
碱性端聚焦不好； 100000V.H 好像有点多，可以尝试缩短聚焦V.H数。（缩短后有可能会造成酸性端又聚焦不够，所以可能需要找到平衡点）。 二向可以试试4-5%的浓缩胶+10-12%的分离胶。

你好，本人也出现了楼主的情况，不懂到底原因出在哪？希望您能帮忙告知原因，万分感谢!(图片上传不了）——跟楼主情况一样
胶长11cm,ph3-10,G250染色
一向程序：被动水化 12h
200V 5h
500V 1h
1000V 1h
8000V grad 3h
8000V 64000vhr
1000V 10h
二向：恒压 90V 1h
150v 8h
(GE仪器）
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12楼2014-11-21 21:33:03
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