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guxiaolong金虫 (小有名气)
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液相色谱混合标准品标准曲线制备的问题
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查文献有以下一段话： 标准品定量工作曲线的制作: 分别配制1000μmol/ L 的dC、 dA、 dG 和 dT 及500 μmol/ L 的metC单一标准品溶液,依照上述色谱条件进行单一标准品的HPLC 分析,确定其洗脱峰的保留时间。而后分别配制5 个不同浓度梯度的metC 与 dC、 dA、 dG 和dT 混合标准品溶液(浓度以metC 浓度+ dC、 dA、dG 和 dT 浓度表示, 分别为 12. 5 μmo l/ L + 25μmol/ L、 25μmo l / L+ 50μmol/ L、 125μmo l / L+ 250μmol/ L、 250μmol/ L+ 500μmol/ L、 500μmol/ L+1000μmol/ L) , 依照上述色谱条件对不同浓度梯度混合标准品进行HPLC 分析,利用Mi l lennium32 色谱软件建立各标准品峰面积( y )与浓度( x ) 间的定量工作曲线。 我试验最主要的目的是测定其中（metC/metC+dC）的百分比。当然也想了解每种组分在样品中的浓度百分比。所以我想请问一下，标准曲线的制作是分别配置不同浓度的5种标准品进行标准曲线的制作就行，还是必须也像上文提到的，还需要配置成混合标准品溶液制作标准曲线呢？这个问题我不是很明白。 |
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