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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取，超螺旋前面还有一条带，怎么回事？
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5xiaosh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by longrna at 2011-12-19 09:16:15:
遇到过质粒提出来有“杂”带的情况，如果测序有问题说明菌有问题。重新转化吧。

嗯(⌒-⌒; )
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11楼2011-12-19 11:48:52
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
5xiaosh: 回帖置顶 2011-12-20 14:22:01
5xiaosh(金币+2): 我重新提了一次，注意裂解时间，裂解液体积，只有两条带了，还是操作的问题。 2011-12-20 14:23:32
质粒提几条带无所谓的。关键是酶切以后是什么情况.提的时候力道不一样可能会有不同的结果.
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12楼2011-12-19 12:26:53
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5xiaosh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by skkyy88888 at 2011-12-19 12:26:53:
质粒提几条带无所谓的。关键是酶切以后是什么情况.提的时候力道不一样可能会有不同的结果.

我们实验室都送去测序，我还没做过酶切实验…(−_−＃)
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13楼2011-12-19 12:34:40
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xhy0016

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种杂带的话，一般是由原始宿主菌自带的质粒引起的，比如说，Rosetta这个表达菌株就有自己的质粒，应该没有问题的，呵呵
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14楼2011-12-19 19:29:08
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5xiaosh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by xhy0016 at 2011-12-19 19:29:08:
这种杂带的话，一般是由原始宿主菌自带的质粒引起的，比如说，Rosetta这个表达菌株就有自己的质粒，应该没有问题的，呵呵

谢谢，您的观点很新颖，我确实不知道我们实验室所用的菌种都有哪些，我想当然的以为都是DH5a。不过别人提的时候没这种情况的…(^_^*)
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15楼2011-12-19 19:44:59
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放浪形骸1

金虫 (小有名气)
最近提质粒也遇到了和您一样的问题，请问您的问题解决了么？是菌种的问题么? 非常感谢您！期待您的回复。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

EinsteinIII
16楼2013-10-19 10:21:47
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EinsteinIII

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
16楼: Originally posted by 放浪形骸1 at 2013-10-19 10:21:47
最近提质粒也遇到了和您一样的问题，请问您的问题解决了么？是菌种的问题么? 非常感谢您！期待您的回复。

我也遇到了这个问题，不知道是什么东西。
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Hello,World!
17楼2014-02-16 10:07:00
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wanjunfei153

铁虫 (初入文坛)
听说过碱变性超螺旋质粒，酶切可能且不开，有可能就是楼主的这种情况。
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18楼2014-02-17 12:33:48
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Stanley Yu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by longrna at 2011-12-19 09:16:15
遇到过质粒提出来有“杂”带的情况，如果测序有问题说明菌有问题。重新转化吧。

我今天也遇到了这样的问题。求解？
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19楼2015-12-08 14:40:32
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