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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞消化液D-Hanks还是PBS？
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)

[交流] 细胞消化液D-Hanks还是PBS？ 已有7人参与

如题  消化液用D-Hanks和PBS配制 各有什么不同？
配制好的消化液各位是怎么储存的？-20还是4度
我们经常是4度保存，但我发现上次（一个月前）配制的消化液，现在消化能力很弱。

另外 网上看到可以用无血清的培养基配制 各位有人试过没 效果怎样?
主要是D-Hanks配制起来太麻烦 配1L用不了，配100ML又太难精确称量。

[ Last edited by gigiloveu on 2011-12-14 at 11:01 ]
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1楼 2011-12-14 10:47:55
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laokei

金虫 (正式写手)
★ ★
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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-12-14 19:58:50
D-Hanks配胰酶消化液；好配啊，配1L分装嘛，可以用很久了，洗细胞的时候也可以用
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2楼2011-12-14 15:21:42
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yqq-nobel

银虫 (正式写手)
★
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D-Hanks配胰酶消化液，分装保存放-20，要用的就放4度保存，差不多可以用上再三个星期吧
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3楼2011-12-14 16:06:21
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)
也就是说 洗细胞的时候 可以用PBS 也可以用D-Hanks？

我们实验室是直接用配好的D-Hanks（未灭菌））把胰蛋白酶和EDTA什么的溶解了  然后过滤后就可以用了。

那么，要配消化液，是不是需要先将D-Hanks高压灭菌然后再配消化液，之后再过滤？

[ Last edited by gigiloveu on 2011-12-14 at 17:05 ]
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4楼2011-12-14 16:56:33
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
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PBS配好后过滤，0.25%
效果不好就加0.02%的EDTA

[ Last edited by silicare on 2011-12-14 at 17:33 ]
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5楼2011-12-14 17:31:11
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seewindow

新虫 (小有名气)
★
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en, you r right.
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6楼2011-12-14 21:27:15
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铁板烧你真好

金虫 (初入文坛)
★
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胰蛋白酶应保存于-20℃，在2-8℃保存时间很短就会失活，缓冲溶液多用D-Hanks，如果偷懒，用生理盐水都可以的
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7楼2011-12-14 21:51:36
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gigiloveu

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 铁板烧你真好 at 2011-12-14 21:51:36:
胰蛋白酶应保存于-20℃，在2-8℃保存时间很短就会失活，缓冲溶液多用D-Hanks，如果偷懒，用生理盐水都可以的

最近消化液消化能力弱，我也怀疑是胰蛋白酶活性降低的问题。我看了一下，我们的胰蛋白酶瓶子上标的储存条件是4度，而不是通常的-20度，因此，我们的胰蛋白酶是按照说明长期存于4度的。
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8楼2011-12-15 08:38:24
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
★
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pbs    -20较长时间储存  4度短时间储存
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9楼2011-12-15 12:35:24
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铁板烧你真好

金虫 (初入文坛)
★
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4℃储存的胰蛋白酶我没见过，哪说明书上没标明用什么缓冲液稀释吗
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10楼2011-12-15 19:54:41
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