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细胞消化液D-Hanks还是PBS?
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gigiloveu
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细胞消化液D-Hanks还是PBS?
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如题 消化液用D-Hanks和PBS配制 各有什么不同?
配制好的消化液各位是怎么储存的?-20还是4度
我们经常是4度保存,但我发现上次(一个月前)配制的消化液,现在消化能力很弱。
另外 网上看到可以用无血清的培养基配制 各位有人试过没 效果怎样?
主要是D-Hanks配制起来太麻烦 配1L用不了,配100ML又太难精确称量。
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Last edited by gigiloveu on 2011-12-14 at 11:01
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D-Hanks配胰酶消化液;好配啊,配1L分装嘛,可以用很久了,洗细胞的时候也可以用
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2011-12-14 15:21:42
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D-Hanks配胰酶消化液,分装保存放-20,要用的就放4度保存,差不多可以用上再三个星期吧
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2011-12-14 16:06:21
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也就是说 洗细胞的时候 可以用PBS 也可以用D-Hanks?
我们实验室是直接用配好的D-Hanks(未灭菌))把胰蛋白酶和EDTA什么的溶解了 然后过滤后就可以用了。
那么,要配消化液,是不是需要先将D-Hanks高压灭菌然后再配消化液,之后再过滤?
[
Last edited by gigiloveu on 2011-12-14 at 17:05
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2011-12-14 16:56:33
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PBS配好后过滤,0.25%
效果不好就加0.02%的EDTA
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Last edited by silicare on 2011-12-14 at 17:33
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2011-12-14 17:31:11
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胰蛋白酶应保存于-20℃,在2-8℃保存时间很短就会失活,缓冲溶液多用D-Hanks,如果偷懒,用生理盐水都可以的
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2011-12-14 21:51:36
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7楼
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Originally posted by
铁板烧你真好
at 2011-12-14 21:51:36:
胰蛋白酶应保存于-20℃,在2-8℃保存时间很短就会失活,缓冲溶液多用D-Hanks,如果偷懒,用生理盐水都可以的
最近消化液消化能力弱,我也怀疑是胰蛋白酶活性降低的问题。我看了一下,我们的胰蛋白酶瓶子上标的储存条件是4度,而不是通常的-20度,因此,我们的胰蛋白酶是按照说明长期存于4度的。
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2011-12-15 08:38:24
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pbs -20较长时间储存 4度短时间储存
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2011-12-15 12:35:24
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4℃储存的胰蛋白酶我没见过,哪说明书上没标明用什么缓冲液稀释吗
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2011-12-15 19:54:41
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