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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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温润如玉73

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何证明两种蛋白质功能上互补

我现在的实验需要证明两种蛋白功能上是互补的。我已经将两个基因A,B分别敲除掉了,结果都没有太大变化,但是将两个基因A+B共同缺失,与对照相比,差异很大。就推测A和B蛋白在功能上是互补的。想问问有经验的人,有没有什么快速方便的方法能检测到A和B蛋白互补关系。
      比如说两种荧光标记,WESTERN等就不必了。谢谢啦。
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shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我觉得楼主你的实验结果基本可以证明了,如果做WB是看蛋白表达差异,只能说明蛋白被敲除不表达,其实在转录水平做一个分子验证也可以的。如果要分析这两个蛋白是否互补,最好能找到共同底物,证明它对底物摧化水平的影响,可以测酶活,可以测体内产物水平。酶的功能是在底物和产物上体现的吧。个人想法,仅供参考…
5楼2011-12-14 08:30:46
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shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
互补和互做没关系吧,怎么用WESTERN和荧光呢,请问这两种是什么类型的蛋白
2楼2011-12-13 23:52:37
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温润如玉73

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by shaquila at 2011-12-13 23:52:37:
互补和互做没关系吧,怎么用WESTERN和荧光呢,请问这两种是什么类型的蛋白

先谢谢了。是这样的情况。A蛋白是黄素还原酶,B蛋白是硫氧还蛋白还原酶。我当时做的突变株,单独突变掉A或者B,都没有变化;将A和B共同缺失,变化很大。将双突变株中回补A或者B,又恢复表型了。所以推测A和B蛋白在功能上是互补的。为了证明蛋白的情况,我导师让我做WESTEN,但是我想明年正常毕业,文章还没有发,就欠缺这部分证明,做WESTERN又比较浪费时间,所以想问问有没有什么有效的方法。
3楼2011-12-14 00:44:30
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amms_8

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
分别敲除掉,没有太大变化是什么意思?
4楼2011-12-14 08:01:53
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