做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why??? - 分子生物 - 综合其他

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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

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我想说是不是你以前的载体上有同样的酶切位点？或者是否存在酶切位点甲基化？买一个dna快速连接试剂盒试试，还有就是质粒抽提试剂盒要买专门的提取大质粒的。你转化效率太低。。。

[ 发自小木虫客户端 ]

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21楼2015-06-08 19:20:17

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wxxiaomuc

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你好我最近也是遇到了这个问题请问你是怎么解决的万分感谢已经做了2个月了

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22楼2016-01-03 17:19:41

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wxxiaomuc

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引用回帖:

16楼: Originally posted by hww2012100 at 2013-01-10 19:32:54
我最近也是这样，酶切后的目的片段和酶切载体大小都对，只要连上，大小就变了，是从原来的14kb 变到5kb，并且挑的单克隆也是阳性的，扩增的目的片段特亮，只要一提质粒大小都变。试了好多次，还是这样，上面的建议我 ...

请问你是怎么解决的我已经做了2个月了每次一提质粒就变小了5000BP 崩溃

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23楼2016-01-03 17:21:43

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