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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 跪求，超声波破碎真菌细胞壁的条件，在线等。。。。
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研
引用回帖:
楼: Originally posted by HarveyWang at 2011-12-15 09:18:35:
超声清洗仪，不行。
用研钵研磨加提取的有机溶剂。这是最简单的方法了。

你知道发酵液有多少水分吗 80L呢，我得旋蒸到啥时候啊。。。。这个不现实。。。。
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11楼2012-02-24 00:43:26
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windbellwang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+5): 新虫加油 2012-02-24 10:42:15
嗯~我也是要提取胞内小分子物质~清洗仪不行~还得用破碎仪~！我所知道的是处理细菌细胞时，现在低温下用液氮固定研磨或者是洗涤菌体后用超声破碎仪~我觉得都可以试一下，因为对于你的目标提取物来说，不同方法效果不同~！希望有帮助~
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12楼2012-02-24 09:59:13
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windbellwang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by newtime007 at 2011-12-15 10:09:01:
超声破碎的一般条件：功率300w，20分钟。
超声前菌体预处理：菌液离心，用PBS洗涤2-3遍，然后按原菌液体积的1/5-1/10加入裂解液。裂解液成分：50mMTris-HCl，pH8.0.0.2mMEDTA，100mMNaCl，加溶菌酶100ug/ml，0.1 ...

这个方法我感觉好像不行，虽然裂解液跟溶菌酶比价有效~但目标产物太容易受到所加溶剂的干扰了~！不利于后续提取、检测或者使用~！
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13楼2012-02-24 10:05:37
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研
引用回帖:
13楼: Originally posted by windbellwang at 2012-02-24 10:05:37:
这个方法我感觉好像不行，虽然裂解液跟溶菌酶比价有效~但目标产物太容易受到所加溶剂的干扰了~！不利于后续提取、检测或者使用~！

非常同意……我没别的要求，只想用超声破碎细胞壁而已，最好不要加试剂什么的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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14楼2012-02-24 13:18:09
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fenghan06

银虫 (小有名气)
bead beating, 然后用centrifugation做一下子fractionation来提取你想要的化合物就行了。
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15楼2012-09-06 08:24:29
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耶鲁蜀黍

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2011-12-14 12:12:00
我们一般用丁酮或者甲醇浸泡下，超声清洗仪里破碎30min。

您好，麻烦问一下你们做的是什么真菌？是AM真菌吗？我想了解一下具体需要加多少的丁酮或者甲醇。看到之后麻烦回复一下。谢谢！
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新手上路，请多多照顾
16楼2015-10-21 15:28:23
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耶鲁蜀黍

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by jiyannangxj at 2012-02-24 00:42:25
这个可以考虑。。。。我看到的文献用80%丙酮水。...

您好，我们也在做真菌的破壁，麻烦问一下您看的是哪篇文献上面有说加多少丙酮水以及浓度是多少，希望您能告知一声。
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新手上路，请多多照顾
17楼2015-10-21 15:31:01
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李丽丽0421

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by happybenny at 2011-12-13 19:57:44
那个不行，必须用超声破碎仪，不行的话你煮沸后用乙醇破细胞壁，也许可以，我破原核细胞就是这样的。

你好，我想询问你对真菌细胞壁破壁方面需要怎么处理呢？谢谢
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18楼2016-03-24 16:38:14
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我是骆驼

金虫 (正式写手)
自己定个时间梯度，然后看看破壁率。

发自小木虫Android客户端
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多学习多交流
19楼2016-03-24 17:10:28
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Yana_peng

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2011-12-14 12:12:00
我们一般用丁酮或者甲醇浸泡下，超声清洗仪里破碎30min。

您好，我想问下，我做真菌预处理秸秆的，到了后期想分开秸秆和真菌，请问下这种方法适用吗？谢谢啦！
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20楼2019-07-12 15:49:19
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