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Roche的LC480数据分析
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最近用Roche的LC480做了几次绝对定量,但在数据处理和分析时遇到些问题。 (1)制作的标准曲线可否导入到EXCEL中计算,还是直接应用软件中自动生成的扩增效率,但软件中没有R2?我发现导入EXCEL中计算的与软件自动计算的斜率有差别。 (2)Roche的扩增效率与ABI等的扩增效率之间如何换算,是不是Roche的扩增效率减一就可以了,还是Roche的扩增效率除2? (3)我做了40个cycler,最后一个稀释梯度(5个重复)的Cp值都为35(虽然我上一个稀释梯度的Cp值大约为32),但用肉眼看(从标准曲线上面的荧光值对应cycler的图看),这几个的Cp值不应该一样,是否这个稀释梯度已经超过了动力学范围,所以都自动给出35? (4)不知道哪有Roche的LC480讨论专版? 谢谢了!! |
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