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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 大鼠肾组织怎样保存2周后提RNA
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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

[求助] 大鼠肾组织怎样保存2周后提RNA

小虫想从肾组织中提取总RNA，然后做RT-PCR。有两个问题想请教一下大家:1、这个组织我不能对其立即就提总RNA，因为要放假了，只能2周之后才能再提。这样的话，我应该把组织怎样进行保存才好呢？2、从组织中提取总RNA用什么方法比较好呢？谢谢大家了~
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1楼 2011-12-11 16:56:49
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victor_2006

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2011-12-11 21:32:38
切成提取RNA的的量，放在冻融管，直接用液氮冻了，放-70冰箱里边。
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2楼2011-12-11 21:21:47
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pxmyz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100(金币+1): 3Q 2011-12-12 21:28:59
小量多份冻存于-70度冰箱。
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Ican，Ido.
3楼2011-12-12 10:15:41
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sdgxxty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100(金币+1): 谢谢！ 2011-12-12 21:29:12
xiaoxiao270(金币+1): 多谢 2011-12-12 21:30:29
过来人建议：直接整个组织-80°冻存，两个月没问题。为了避免反复冻存，建议组织横切，锡箔纸包裹并标记。提取RNA需要组织量很小，0.1g就够了，建议使用TRIZOL提取，进口的贵点，但质量好，能保证纯度。
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通跃--山巍巍乎，风雨不动
4楼2011-12-12 11:44:15
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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sdgxxty at 2011-12-12 11:44:15:
过来人建议：直接整个组织-80°冻存，两个月没问题。为了避免反复冻存，建议组织横切，锡箔纸包裹并标记。提取RNA需要组织量很小，0.1g就够了，建议使用TRIZOL提取，进口的贵点，但质量好，能保证纯度。

谢谢！我还想问一下：组织应该怎样处理了之后再加Trizol呢？还有国产的Trizol多加一些可以吗？
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5楼2011-12-12 21:14:55
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sdgxxty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 老实人sdu3375 at 2011-12-12 21:14:55:
谢谢！我还想问一下：组织应该怎样处理了之后再加Trizol呢？还有国产的Trizol多加一些可以吗？

用剪刀和镊子，用剪刀在2ml离心管里剪碎，接触组织的所有容器和物品要DEPC水浸泡过夜，防止污染，尽力剪碎后加1mlTrizol，用量看说明书。国产的你试试吧，我没用过。
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通跃--山巍巍乎，风雨不动
6楼2011-12-13 10:19:02
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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sdgxxty at 2011-12-13 10:19:02:
用剪刀和镊子，用剪刀在2ml离心管里剪碎，接触组织的所有容器和物品要DEPC水浸泡过夜，防止污染，尽力剪碎后加1mlTrizol，用量看说明书。国产的你试试吧，我没用过。

组织是剪碎处理好还是用匀浆器处理好呢？或者用液氮研磨（不大好操作）。。。用剪刀剪碎再提取总RNA的方法您试过吗？谢谢！
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7楼2011-12-13 19:00:42
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sdgxxty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

老实人sdu3375(金币+8): 2011-12-13 20:02:42
引用回帖:
7楼: Originally posted by 老实人sdu3375 at 2011-12-13 19:00:42:
组织是剪碎处理好还是用匀浆器处理好呢？或者用液氮研磨（不大好操作）。。。用剪刀剪碎再提取总RNA的方法您试过吗？谢谢！

自己做过的，剪刀剪碎很简单的。
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通跃--山巍巍乎，风雨不动
8楼2011-12-13 19:05:05
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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)
好的  谢谢啊~
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9楼2011-12-13 20:02:16
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fishyr

金虫 (正式写手)
请问有没有人知道，我要测试小鼠肝脏中酶的活性，组织块保存在-20℃可以吗？能放几天呢？
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10楼2012-08-23 14:40:04
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