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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

[求助] 大鼠肾组织怎样保存2周后提RNA

小虫想从肾组织中提取总RNA,然后做RT-PCR。有两个问题想请教一下大家:1、这个组织我不能对其立即就提总RNA,因为要放假了,只能2周之后才能再提。这样的话,我应该把组织怎样进行保存才好呢?2、从组织中提取总RNA用什么方法比较好呢?谢谢大家了~
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victor_2006

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2011-12-11 21:32:38
切成提取RNA的的量,放在冻融管,直接用液氮冻了,放-70冰箱里边。
2楼2011-12-11 21:21:47
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pxmyz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100(金币+1): 3Q 2011-12-12 21:28:59
小量多份冻存于-70度冰箱。
Ican,Ido.
3楼2011-12-12 10:15:41
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sdgxxty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-12-12 21:29:12
xiaoxiao270(金币+1): 多谢 2011-12-12 21:30:29
过来人建议:直接整个组织-80°冻存,两个月没问题。为了避免反复冻存,建议组织横切,锡箔纸包裹并标记。提取RNA需要组织量很小,0.1g就够了,建议使用TRIZOL提取,进口的贵点,但质量好,能保证纯度。
通跃--山巍巍乎,风雨不动
4楼2011-12-12 11:44:15
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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sdgxxty at 2011-12-12 11:44:15:
过来人建议:直接整个组织-80°冻存,两个月没问题。为了避免反复冻存,建议组织横切,锡箔纸包裹并标记。提取RNA需要组织量很小,0.1g就够了,建议使用TRIZOL提取,进口的贵点,但质量好,能保证纯度。

谢谢!我还想问一下:组织应该怎样处理了之后再加Trizol呢?还有国产的Trizol多加一些可以吗?
5楼2011-12-12 21:14:55
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sdgxxty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 老实人sdu3375 at 2011-12-12 21:14:55:
谢谢!我还想问一下:组织应该怎样处理了之后再加Trizol呢?还有国产的Trizol多加一些可以吗?

用剪刀和镊子,用剪刀在2ml离心管里剪碎,接触组织的所有容器和物品要DEPC水浸泡过夜,防止污染,尽力剪碎后加1mlTrizol,用量看说明书。国产的你试试吧,我没用过。
通跃--山巍巍乎,风雨不动
6楼2011-12-13 10:19:02
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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by sdgxxty at 2011-12-13 10:19:02:
用剪刀和镊子,用剪刀在2ml离心管里剪碎,接触组织的所有容器和物品要DEPC水浸泡过夜,防止污染,尽力剪碎后加1mlTrizol,用量看说明书。国产的你试试吧,我没用过。

组织是剪碎处理好还是用匀浆器处理好呢?或者用液氮研磨(不大好操作)。。。用剪刀剪碎再提取总RNA的方法您试过吗?谢谢!
7楼2011-12-13 19:00:42
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sdgxxty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

老实人sdu3375(金币+8): 2011-12-13 20:02:42
引用回帖:
7楼: Originally posted by 老实人sdu3375 at 2011-12-13 19:00:42:
组织是剪碎处理好还是用匀浆器处理好呢?或者用液氮研磨(不大好操作)。。。用剪刀剪碎再提取总RNA的方法您试过吗?谢谢!

自己做过的,剪刀剪碎很简单的。
通跃--山巍巍乎,风雨不动
8楼2011-12-13 19:05:05
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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

好的  谢谢啊~
9楼2011-12-13 20:02:16
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fishyr

金虫 (正式写手)

请问有没有人知道,我要测试小鼠肝脏中酶的活性,组织块保存在-20℃可以吗?能放几天呢?
10楼2012-08-23 14:40:04
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