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tdhslxiaoyao

新虫 (小有名气)

[求助] 连接转化不成功问题

各位好,我做连接转化,可是在平板上长不出来菌落。错误排除:实验操作,因为已经很细心的转了两次。我感觉如果是连接的问题,我的片段是2、3Kb的大小,如果没有连上,如果空载体转入细胞中,那也应该长出来菌落呀,为什么平板上连个假阳性的菌也没有?两次都失败,特郁闷,求解答,谢谢。
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tdhslxiaoyao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 丫头7976 at 2011-12-05 10:50:45:
我也一直做连接转化,有的时候也是一个不长,有的时候长很多,挑菌落提质粒却没有连上,哎 不知道咋回事,你的片段和载体大小分别是多少,可以交流一下

没有连上那是假阳性啊,载体自连啦。
我用的是3:1的比例,今天我加大了比例试试,看效果怎么样。
11楼2011-12-07 22:12:15
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查看全部 18 个回答

斌斌1990

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-12-03 19:31:28
我觉得有以下几点可能:
1、感受态细胞有问题,建议换批感受态试试,你们的感受态是自己做的吗?是电转还是化转啊?
2、抗性浓度太高了,楼主用的是什么抗性啊?
科研路漫漫修远,吾将实验而求索
2楼2011-12-03 15:31:02
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超然渡陈之家

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


lstt09nk(金币+1): 恩 2011-12-10 10:46:11
你觉得是连接的问题最好把你的连接体系详细点列出来才好分析啊。
3楼2011-12-03 16:59:47
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

涂布太热   烫死啦?
4楼2011-12-03 18:42:14
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