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qinyanyan5

银虫 (小有名气)

[交流] 胶原同细胞混合的人工皮肤,配比 已有3人参与

本人最近在做胶原与细胞混合的人工皮肤,文献中说:在无菌条件下,用醋酸溶液分别按8 g∕L的浓度配制胶原,并加入血清和10×DMEM,用1 mol∕L的NaOH调节胶原的PH值至7.2 ,将成纤维细胞以1×100000 个∕mL的浓度种入胶原中。
     现在有几个问题不解:
     1.   10×DMEM必须加吗,10×DMEM是为胶原内部的细胞提供充足的养分吗?
     2.   这个10×DMEM也就是浓缩10倍的DMEM。往正在培养的细胞培养皿中加几滴10×DMEM,有一部分细胞死了。它混合在胶原中对细胞有不好的影响吗?
     3.   无菌条件下,怎样将PH值快速准确的调到7.2?用精密PH试纸调吗?
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qinyanyan5

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by walnut23 at 2011-12-03 00:37:04:
单纯的细胞不可能在胶原中生长,需要营养;DMEM是细胞培养液的嘛,10×DMEM加进去细胞会死?难道是离子浓度高了。。。感觉很奇怪,一般都不会有事;至于PH检测,还没想到什么无菌的办法,PH试纸最方便,不怕麻烦就 ...

有道理,多谢指点
4楼2011-12-03 12:27:00
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qinyanyan5

银虫 (小有名气)

上帝呀,救救我吧!真的搞不懂这些东西呀
2楼2011-12-02 20:50:29
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walnut23

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
单纯的细胞不可能在胶原中生长,需要营养;DMEM是细胞培养液的嘛,10×DMEM加进去细胞会死?难道是离子浓度高了。。。感觉很奇怪,一般都不会有事;至于PH检测,还没想到什么无菌的办法,PH试纸最方便,不怕麻烦就每次取些上PH计。
3楼2011-12-03 00:37:04
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jingwang7793

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
DMEN加血清是细胞 培养基,培养细胞必须用. 胶原用醋酸配, 酸性强,所以i培养基必须要偏碱性这样才能中和. 至于培养及PH如何才能和酸性胶原中和到7.0 这个你要试. PH在7.0-7.2 就可以了. 记住细胞耐酸不耐碱.就是细胞在酸性环境内可以生长,但在碱性环境中不行. 祝你好运!!!!
JingWang
5楼2011-12-05 06:30:35
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