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houyuanyang

捐助贵宾 (职业作家)

[交流] 急切求助如何均匀紧密装柱

本人现在做色谱主分离
由于主子装得不紧密,或不均匀,几次分离都不好,损失了许多产物,浪费了很多时间
恳请高手指点如何能均匀紧密装柱。(200-300层析硅胶)

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小处不可随便。
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houyuanyang

捐助贵宾 (职业作家)

没压力的冲洗可以赶走气泡么?
小处不可随便。
9楼2007-01-12 15:55:46
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wjmed

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
houyuanyang(金币+3):感谢帮助,感谢鼓励
cordiela(金币+1):感谢参与应助,欢迎常来!
有干法上柱和湿法上柱
干法上柱就是把硅胶直接以粉末装在柱中,然后用循环水泵抽上半个小时,同时用橡胶塞子不断敲打玻璃柱,使硅胶中的空气排除和使硅胶表面平整。这样可以保证硅胶均匀紧密。

不过湿法上柱比干法上柱更为有效:
将硅胶倒入石油醚中,反复搅拌使硅胶分散,同时可以排出气泡。发现没有气泡是,将混悬液体倒入硅胶柱,硅胶在石油醚中会慢慢沉降。打开活塞,放出石油醚至石油醚液面高出硅胶面2公分。这个时候就可以上样了。

另外,在上样后,不管是用上面的那种方法装的硅胶,都需要在样品层上面再加一层硅胶和海砂,以避免在加洗脱液时样品被冲击。

希望你能成功!

[ Last edited by wjmed on 2007-1-11 at 09:04 ]
Timeandtidewaitsfornoman!
2楼2007-01-11 08:57:46
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zhuyongjun2008

★ ★
houyuanyang(金币+2):谢谢,我装的柱子较长,阻力较大,如果一直吸,中间会出气泡么?
把色谱柱的一端塞上玻璃棉,接真空泵,另一端接一漏斗,在抽吸下加入固定相,边装边敲打色谱柱,至固定相不再进入为止。装好后,塞上玻璃棉。装柱要求要填充得均匀,紧密,切忌有空隙。
3楼2007-01-11 09:05:52
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qiu3tian


houyuanyang(金币+1):谢谢
如果是小柱子,一般采用湿法装柱。湿法装柱采用最初的洗脱液将硅胶调成稀糊状,然后沿柱壁轻轻倒入柱子中,尽量避免产生气泡。最好根据柱子的情况先估算硅胶的用量,一次调够所需要用量,以避免二次装柱产生的分层和气泡现象。如果有少量气泡产生,可以用橡胶柱上下轻敲柱体,可以消除气泡。
4楼2007-01-11 09:11:47
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