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houyuanyang

捐助贵宾 (职业作家)

[交流] 急切求助如何均匀紧密装柱

本人现在做色谱主分离
由于主子装得不紧密，或不均匀，几次分离都不好，损失了许多产物，浪费了很多时间
恳请高手指点如何能均匀紧密装柱。（200－300层析硅胶）
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小处不可随便。
1楼 2007-01-11 02:30:10
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wjmed

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
houyuanyang(金币+3):感谢帮助，感谢鼓励
cordiela(金币+1):感谢参与应助，欢迎常来！
有干法上柱和湿法上柱
干法上柱就是把硅胶直接以粉末装在柱中，然后用循环水泵抽上半个小时，同时用橡胶塞子不断敲打玻璃柱，使硅胶中的空气排除和使硅胶表面平整。这样可以保证硅胶均匀紧密。

不过湿法上柱比干法上柱更为有效：
将硅胶倒入石油醚中，反复搅拌使硅胶分散，同时可以排出气泡。发现没有气泡是，将混悬液体倒入硅胶柱，硅胶在石油醚中会慢慢沉降。打开活塞，放出石油醚至石油醚液面高出硅胶面2公分。这个时候就可以上样了。

另外，在上样后，不管是用上面的那种方法装的硅胶，都需要在样品层上面再加一层硅胶和海砂，以避免在加洗脱液时样品被冲击。

希望你能成功！

[ Last edited by wjmed on 2007-1-11 at 09:04 ]
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Timeandtidewaitsfornoman!
2楼2007-01-11 08:57:46
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zhuyongjun2008

★ ★
houyuanyang(金币+2):谢谢，我装的柱子较长，阻力较大，如果一直吸，中间会出气泡么？
把色谱柱的一端塞上玻璃棉，接真空泵，另一端接一漏斗，在抽吸下加入固定相，边装边敲打色谱柱，至固定相不再进入为止。装好后，塞上玻璃棉。装柱要求要填充得均匀，紧密，切忌有空隙。
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3楼2007-01-11 09:05:52
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qiu3tian

★
houyuanyang(金币+1):谢谢
如果是小柱子，一般采用湿法装柱。湿法装柱采用最初的洗脱液将硅胶调成稀糊状，然后沿柱壁轻轻倒入柱子中，尽量避免产生气泡。最好根据柱子的情况先估算硅胶的用量，一次调够所需要用量，以避免二次装柱产生的分层和气泡现象。如果有少量气泡产生，可以用橡胶柱上下轻敲柱体，可以消除气泡。
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4楼2007-01-11 09:11:47
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yifan1_0

金虫 (小有名气)
★
houyuanyang(金币+1):谢谢
粒径那么小，最好用湿法装填！
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5楼2007-01-11 09:16:13
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wade114

金虫 (正式写手)
★ ★
houyuanyang(金币+2):谢谢
我个人建议:湿上柱法
1.把(200－300)层析硅胶溶于试剂中反复搅拌使硅胶分散，一般要搅拌半个小时。

2.发现没有气泡时，倒入前应一直搅拌,直至倒入硅胶柱时

3.倒入硅胶前,硅胶柱子最少有4倍柱直径高度的试剂,然后打开活塞,倒入硅胶.

4.把硅胶加入以后,最后打开活塞,用一倍体积的试剂洗脱硅胶.

5.可以用木棒或吹气球敲打柱子,最后沉降半小时
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6楼2007-01-11 09:48:03
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houyuanyang

捐助贵宾 (职业作家)
”一次加入“是不是很重要
里面有气泡时怎么办？
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小处不可随便。
7楼2007-01-12 10:36:20
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wade114

金虫 (正式写手)
★
houyuanyang(金币+1):谢谢
最好是一次加入的了,如果上的不好,要第二次重上,那样,硅胶要再搅拌好久,那样气泡才能赶出来,或者重新上柱后,多冲洗三个柱体积的试剂,那样气泡基本上就没有的了
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8楼2007-01-12 13:39:15
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houyuanyang

捐助贵宾 (职业作家)
没压力的冲洗可以赶走气泡么？
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小处不可随便。
9楼2007-01-12 15:55:46
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zhuyongjun2008

你说的情况可能会出现，所以装的同时可以轻轻敲打色谱柱，也可以用橡胶柱上下轻敲柱体。
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10楼2007-01-12 15:56:25
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