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yingyu06

铜虫 (小有名气)

[求助] 有谁用过DEAE-sepharose FF分离多糖?

我想请问DEAE-sepharose FF分离之前怎么处理比较好呢?我看过DEAE-sepharose FF的使用说明书,说用缓冲溶液配成匀浆。可是我看有些文献上写用0.5M NaOH,HCl,蒸馏水依次洗。用哪个方法比较好呢?
        还有多糖洗脱时直接用NaCl盐溶液,不加缓冲溶液可以吗?
        我是第一次做,什么都不懂,请做过的大侠给些详细点的指导,不胜感激!!!!
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zn12345

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-22 21:17:30
我用Q-sepharose FF分离海藻多糖,就是直接用水溶胀,NaCl梯度洗脱,没有加缓冲液。
2楼2011-11-22 18:29:39
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yingyu06

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
楼: Originally posted by zn12345 at 2011-11-22 18:29:39:
我用Q-sepharose FF分离海藻多糖,就是直接用水溶胀,NaCl梯度洗脱,没有加缓冲液。

还有我们没有那种专门的设备,没有安玛西亚视频那种专业的仪器,就用那种常规的玻璃柱可以做吗?但是不能控制流量

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2011-11-22 20:55:31
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zn12345

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
yingyu06(金币+10): 恩,明白了,非常感谢 ,如果可以的话可以加你Q吗?我的是309307177 2011-11-23 09:42:35
qinhy(金币+1): 多谢回帖~ 2011-11-23 20:15:50
可以啊,我们也是用玻璃柱,通过旋塞控制流速,分的还比较好,就是上样量太小,得到的样品太少,做个检测可能还行,要做别的根本就不够。
4楼2011-11-23 08:55:04
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Pooooppy

银虫 (初入文坛)

用NaCl梯度洗脱时,梯度如何设定?大家用的都是怎么样的梯度?
5楼2011-12-27 14:20:58
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zcczj

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zn12345 at 2011-11-23 08:55:04
可以啊,我们也是用玻璃柱,通过旋塞控制流速,分的还比较好,就是上样量太小,得到的样品太少,做个检测可能还行,要做别的根本就不够。

我现在就是发现好像分不开,而且用G75的流速很慢,才4毫升每小时。
慢慢的……
6楼2012-10-10 11:22:46
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renwei9612

新虫 (初入文坛)

洗脱缓冲液怎么确定啊?可以用纯水吗?
求大神指导~
7楼2014-10-10 15:34:32
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