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yibinsiyec

木虫 (正式写手)

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[交流] 量子点纳米颗粒荧光效应方面求助

我们知道量子点纳米颗粒是具有荧光效应的，因此可以应用于生物医疗，可以生物成像。现在我采用微生物处理镉离子形成了一百纳米左右的纳米粒子，粒子结构大概就是硫化镉外面包了一层蛋白质类物质，不知道是否还具有荧光效应，量子点纳米颗粒一般都是小于十纳米。求高手指点，希望不吝赐教

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1楼 2011-11-21 10:33:36

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解释一下荧光量子点技术-----以CdSe荧光量子点为例和免疫胶体金技术的基本原理，以供参考。

1.荧光量子点技术-----以CdSe荧光量子点为例：任何量子点的核心都是有过度钛金属构成，其都可以在特定波长的外界光源激发下发生荧光。CdSe是目前量子点最常用的化合物。下面讲一下荧光量子点的构成和作用原理。
（1）CdSe荧光量子点核心：CdSe是荧光量子点的核心（CdSe核心颗粒外包上ZnS层，ZnS层外包上巯基乙酸，巯基乙酸的巯基与ZnS的S形成共价键链接，巯基乙酸的羧基游离。CdSe荧光量子点核心就是用以激发荧光的标记物，荧光直接有CdSe受到激发后产生。CdSe荧光量子点核心本身可以激发荧光，而且其大小不同荧光的波长也不同。
（2）CdSe荧光量子点核心之外的连接的功能蛋白质：
a.可分为识别细胞中的特定的生物大分子（多数为特定的蛋白质）的抗体或者配体或者受体蛋白质，如果说要识别的细胞内的生物大分子是某种蛋白质，一般的识别蛋白往往用该墓白哦蛋白质的单克隆抗体；
b.把荧光量子点引导穿过细胞膜的向导蛋白质，一般是细胞能够自动内吞的蛋白质，比如：转铁蛋白，入核的话还要加上一些入核的氨基酸序列。早期的荧光量子点核心之外的连接的功能蛋白质没有把荧光量子点引导穿过细胞膜的向导蛋白质，那就要用显微注射方法，将量子点导入细胞，工作量就相当大了。
（3）CdSe荧光量子点核心与其核心之外的连接的功能蛋白质之间的化学连接方式：：CdSe是荧光量子点的核心（CdSe核心颗粒外包上ZnS层，ZnS层外包上巯基乙酸，巯基乙酸的巯基与ZnS的S形成共价键链接，巯基乙酸的羧基游离。蛋白质有氨基酸聚合而成，每一个蛋白质至少有一个游离的氨基和一个游离的羧基（有修饰的情况下，一般不不会把N和C末端都修饰了，而会在中间部位修饰Lys/Arg氨基酸残基的游离的侧链氨基与Asp/Glu氨基酸残基的游离的侧链羧基。如果真的把所有的游离的氨基与羧基都修饰了，这样的情况很少见，那么就用修饰分子的游离出活跃的基团，比如羟基，巯基等作为连接位点），那么一般的蛋白质的氨基就可以用碳二亚胺（比如： EDC）在室温下催化讲两者的一个氨基和一个羧基脱水缩合称为一个酰胺键，那么CdSe荧光量子点核心与其核心之外的连接的功能蛋白质之间就通过酰胺键连接到一起。
（4）CdSe荧光量子点的作用原理：实际上进入细胞候就是靠CdSe荧光量子点的单克隆抗体部分识别有关的蛋白质------也就是此单抗的抗原，再用外界光源照射细胞，CdSe荧光量子点的CdSe受激辐射，就暴露了自己在细胞中的位置，同时也就暴露了其上的单抗的抗原（目的蛋白质）的位置。观测荧光要用荧光显微镜或者激光共聚焦显微镜，测定荧光强弱要用荧光光度计。

2.免疫胶体金技术：胶体金（纳米金颗粒）本身可以充当电镜下的标志物。
因为胶体金颗粒能够用电子显微镜直接观察到，所以把胶体金报上有机膜之类接上抗体和内吞蛋白质，原理与CdSe荧光量子点一样，只是显示标签变成了胶体金，有时候胶体金还要与银共同作用，以便加强在电子显微镜下的可观测性。