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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

两个中间加个IRES或2A吧
可能会好些
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
11楼2011-11-18 16:46:12
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547star

木虫 (著名写手)

要是在原始菌可以表达,而克隆过来不表达,很可能是两种生物的SD序列不同,考虑把第二个基因的SD序列--很可能在第一个基因ORF内,进行沉默突变成宿主大肠杆菌的SD序列。另一种可能的原因是有阻遏蛋白结合抑制了表达,需要突变的位置也相似,不过突变范围可以宽点。
为什么
12楼2011-11-18 20:00:09
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莫语铭

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

A是包涵体,应该是核糖体没有脱离A而产生,正是因为这样导致的B不能翻译。
13楼2011-12-03 20:01:20
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chengwei1979

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
7648楼: Originally posted by 回天堂的天使 at 2011-11-16 20:43:03
想请教各位高手一个问题。我有两个酶基因需要表达,由于两个基因在染色体上的位置是相邻的,A800bp左右,B为1.1kb左右,A在B的上游,中间只间隔了19bp,并且已经验证了它们处于同一个操纵子,因此考虑将两个基因一起 ...

和我情况一样哦,我两个基因中间相隔40bp,如果连在一起导入PET32的话会不会只表达一个,还有,纯化的话,是不是两个蛋白都带有his标签?
只有白富美和高富帅才有青春,我的青春小学就没了
14楼2013-04-01 16:59:21
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