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怎么都行

银虫 (小有名气)

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[求助] 二次PCR产物弥散

第一轮PCR 产物微弱（上图），第二轮PCR用第一轮的产物做模板，无论模板稀释多少倍，怎么调整引物浓度和退火温度，结果都是如下图般——一片弥散带。求助高手这该怎么办呢？郁闷中。

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1楼 2011-11-10 14:11:15

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ixido

木虫 (小有名气)

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我倒建议楼主调整一下你PCR的条件
尽管你第一次PCR的结果有，但是条带很浅。如果第一次PCR出来的条带就是你想要的，那么引物什么的就不应该有问题，只要你好好的调整一下PCR的条件，很有可能提高产物的量。
如果还是不行，再去换引物。我想你设计引物也是认真考虑的。

除非楼主是做overlap或者别的必须要二次PCR的实验，建议你不要做，因为PCR经常会有一些杂带，尽管量很少很少，但是经过PCR这种指数增长的扩增，也会得到很多产物的。所以，还是调整一下你的PCR条件，多做几管，一次反应成功吧。祝福你。