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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 进样第一针总是走不好的原因？
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lanhui_yang

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC 进样第一针总是走不好的原因？

做液相制备，柱子平衡很长时间，进相同样品，第一针总是走不好，分离效果很差，消耗时间短。第二针分离效果明显好于第一针。从第三针开始稳定出峰，且分离情况均良好。连续好几天都是这种情况。各位大侠，能否帮忙解释下这种现象的原因？
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加油加油加油
1楼 2011-11-10 13:45:25
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foxling2

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这种明显不是没平衡好，我看是进样器的问题。你试试在进样前先将进样阀切到inject的位置冲洗一段时间，然后在切到load的位置。来回两次，然后在进样看看
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yyh
12楼2011-11-11 17:10:23
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ntzsl

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
408851978(金币+2): 虽然不是问题的答案，但是分析出了梯度洗脱的问题 2011-11-11 13:13:50
lanhui_yang(金币+2): 2011-11-14 12:55:07
这种情况是由于你的流动相的问题，估计没错你是用的梯度洗脱吧。平衡的时候极性个走样的极性相差很大造成的。在平衡的时候色谱柱的填料基团发生倒伏，所以你每次平衡后第一针会走不好。然后随着时间，原来倒伏的基团又会重新立起来，后面的图谱会越来越趋于稳定。
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大家互相学习
2楼2011-11-10 13:55:03
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lanhui_yang

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ntzsl at 2011-11-10 13:55:03:
这种情况是由于你的流动相的问题，估计没错你是用的梯度洗脱吧。平衡的时候极性个走样的极性相差很大造成的。在平衡的时候色谱柱的填料基团发生倒伏，所以你每次平衡后第一针会走不好。然后随着时间，原来倒伏的基 ...

走的是等度，第二天进同一样品还是第一针分离很差
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加油加油加油
3楼2011-11-10 15:46:12
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yukepotato

金虫 (正式写手)

美猴王

【答案】应助回帖

应该是没有平衡好吧！
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永远不要带着问题去找你的上司！
4楼2011-11-10 16:04:38
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