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丑娃娃

新虫 (小有名气)

[交流] 人血浆使用?急急急 已有6人参与

广大药学高手:
我是学生物出生,迫于各种无奈,现在要做药代动力学,体外实验,现在要做的是,在血浆中的药物代谢,其实就是测定降解半衰期和速率常数,所以用到冰冻血浆,
由于我每次实验用到的血浆体积大概只有十到几十毫升不等,我只有一袋150ml的,现在放在-20度保存的,我是不是应该37度水浴融化后分装,然后再次冰冻保存?这种反复冻融对血浆有影响吗?如果可以这样反复冻融?需要无菌操作吗?还有冷冻,需要液氮速冻吗?分装是不是可以用25ml这种离心管啊?
说的有点乱,希望有经验的,多多指点
谢谢了
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congzicongzi

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1, 不必用37度的水融化哈,常温的水就可以
2, 反复冻融对于做药代的试验是没有影响的
3, 一般我们直接用玻璃试管分装,放在-35度下页不会破的
感觉楼主把事情想得挺复杂的
2楼2011-11-10 10:56:59
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
是做血浆水解酶的代谢吧 做前药的么
可以先将血浆分成小管分装
每次取一管融化用来实验
一般最好保存在-80°冰箱中 -20°保存的时间短的话也凑合
实验过程通常采用25%-50%血浆(pH7.4的磷酸缓冲液稀释)
血浆中一般的代谢比较慢
还需要做肝和小肠微粒体或者S9中的代谢
3楼2011-11-10 14:14:09
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S型君

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
建议搂住还是分装比较好   我们再做试验的时候 都会分装 避免污染 多用少取
我们的目标是:快乐就好!!
4楼2011-11-10 16:12:00
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丑娃娃

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2011-11-10 14:14:09:
是做血浆水解酶的代谢吧 做前药的么
可以先将血浆分成小管分装
每次取一管融化用来实验
一般最好保存在-80°冰箱中 -20°保存的时间短的话也凑合
实验过程通常采用25%-50%血浆(pH7.4的磷酸缓冲液稀释)
血 ...

感谢您的回答
我大概用半个月 -20度可以保存不?
我参考的一篇JMC文献,里面用的是80%血浆,20%PBS
您经验值是25-50%比较好吗
谢谢
5楼2011-11-10 21:12:10
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
有文献报道 参考文献就行
不同文献的血浆用量可能差的比较多
我选的是25%的血浆
6楼2011-11-11 08:29:09
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nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
不如溶一次 分装以后在冻住
以后用一次取一支就好了 呵呵
湖深而静溪浅而鸣
7楼2011-11-16 16:36:30
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林鹄

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
参考化学药物临床药代动力学研究指导原则,其中方法学是要求做稳定性试验的,其中就包括冻融试验稳定性的,就是LZ所担心的
I saw, Icame, I conquered.
8楼2012-02-20 14:19:28
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shrimp5555

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不能用37℃水浴!只能放4℃解冻再拿出来常温,不然会析出蛋白的!
大大傻气加上少少耍流氓
9楼2014-06-12 12:06:25
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