24小时热门版块排行榜    

查看: 1126  |  回复: 4
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看

瓶儿花

金虫 (小有名气)

[求助] 链霉菌建库

因实验需要,要建立链霉菌文库,目前,基因组DNA提取出来的纯度和浓度不够实验要求,我想请问各位虫友,有谁有做过这方面的内容,请给予相关的指导,如基因组DNA提取的方法有哪些要注意的,跟普通的方法有什么不同的,已经提了4个月了。。。跪求!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guojing113

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

本人也做链霉菌文库,DNA探索了半年才弄的差不多,刚刚开始的时候一点也提取不出来,看了很多文献总结了方法后提出来了,要是可以的话,可以留下QQ交流
听雨
2楼2011-11-23 17:08:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuangzi8761

银虫 (著名写手)

为何不让公司建库呢??
3楼2011-11-23 18:34:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuechangwu

银虫 (正式写手)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-11-09 10:45:06:
因实验需要,要建立链霉菌文库,目前,基因组DNA提取出来的纯度和浓度不够实验要求,我想请问各位虫友,有谁有做过这方面的内容,请给予相关的指导,如基因组DNA提取的方法有哪些要注意的,跟普通的方法有什么不同 ...

本人建了4个链霉菌基因组文库,很简单呀
4楼2011-11-23 19:49:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuechangwu

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good! 2011-11-23 20:45:29
瓶儿花(金币+30): 谢谢,我试试看。 2011-11-26 23:14:02
引用回帖:
1楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-11-09 10:45:06:
因实验需要,要建立链霉菌文库,目前,基因组DNA提取出来的纯度和浓度不够实验要求,我想请问各位虫友,有谁有做过这方面的内容,请给予相关的指导,如基因组DNA提取的方法有哪些要注意的,跟普通的方法有什么不同 ...

如果是建立fosmid文库的话采取 改良热酚法:28度液体摇菌3天左右,5000rpm收集菌体,STE洗涤2次, 加入溶菌酶 37度过夜,加入2%SDS 55度1h,后边就是酚氯仿抽提,乙酸钠/乙醇沉淀

如果是构建bac库,就要利用低熔点琼脂糖酶解法
5楼2011-11-23 20:08:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 瓶儿花 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 06:21 by gy1nBQXYQJqL
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 4/200 2026-08-29 05:45 by gy1nBQXYQJqL
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-29 05:13 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 国自然评审意见 +11 wangmingqi 2026-08-28 15/750 2026-08-29 00:17 by fangyl2005
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见