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ral_hope木虫 (小有名气)
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ThT binding assays相关的一句话
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Under standard conditions, a stock solution of the rabbit/human/bovine PrP in 6 M guanidine hydrochloride was diluted to a final concentration of 10 M and incubated at 37o C in PBS buffer (pH 7.0) containing 1 M guanidine hydrochloride and 3 M urea in the absence and presence of different concentrations of crowding agents with continuous shaking at 220 rpm, and samples (50 l) were diluted into PBS buffer containing 12.5 M ThT, giving a final volume of 2.5 ml. The fluorescence of ThT was excited at 450 nm with a slit-width of 7.5 nm and the emission was measured at 480 nm with a slit-width of 7.5 nm on an LS-55 luminescence spectrometer (PerkinElmer Life Sciences, Shelton, CT). 里面的方框，表示 “微” |
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fjtony163
版主 (文坛精英)
米米
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【答案】应助回帖
ral_hope(金币+5, 翻译EPI+1): 和我想的差不多，但是这个文章还是有问题不能理解，算了，先跳过去了。谢谢啦~ 2011-11-08 08:08:22
| 在标准状况下，兔/人/猪 PrP 在6M的盐酸胍里的原液被稀释至10mM，保存在37C条件下和（pH=7.0）的PBS缓冲液，其中有1M的盐酸胍和3M的尿素。整个溶液又在无聚集剂和不同浓度的agent里以220转持续震荡。样本（50mL）将在有12.5mM ThT的PBS缓冲液里稀释，总体积为2.5mL。ThT的荧光性在缝隙宽度为7.5nm时在450nm波长为最高峰，在LS-55荧光谱仪上辐射在缝隙宽度为7.5nm，波长为480nm时可以测到。 |
2楼2011-11-08 04:04:30