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学学习唱唱歌

新虫 (初入文坛)

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[交流] 急问，关于透析

我用1.5摩尔氯化钠提糖蛋白，（微波辅助），离心，之后4摄氏度透析的时候，透析袋里出现大量絮状沉淀，这到底是怎么回事啊？急问，求高人指点，多谢！

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1楼 2011-11-05 13:46:00

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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

13楼: Originally posted by 学学习唱唱歌 at 2011-11-07 10:02:55:
你好，我昨天做了梯度透析，效果一直很好，可是当我从0.4mol/L降至0.1mol/L的时候，透析袋内又出现了絮状沉淀，我都要疯了，我以为这个浓度差不大呢，已经快成功了却死在那了我都要自杀了！！！后来我没办法，死 ...

你中间应该在加个梯度的，时间可以缩短些。我个人认为既然蛋白能重新溶解估计变性的可行性很小，我以前出现的沉淀就怎么也溶不了完全变性。我不知你的蛋白能不能直接做个简单的反应测活性，要是这样可以的话就可以一直监测活性变化。另外我的蛋白在透析过程中也不是很稳定，后来实验发现加入一定的有机溶剂可是它稳定，我就在透析液中添加了5%的乙醇，效果也很好的。