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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何测定培养基中的残糖含量
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kcb331202273

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

山东省科学院生物研究所有个生物传感分析仪，测葡萄糖残糖很好用。可以实时监测，我们在用。
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旁观者的姓名永远不会出现在比赛的记分牌上。
11楼2011-11-04 09:30:18
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cheauyn

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

SBA生物传感分析仪，这个最简单方便了。
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12楼2011-11-04 09:58:37
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leiyinwill

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用DNS法吧  就是配起来比较麻烦 配好也需要一周以后才能用  如果是急用又没有现成的不建议用DNS法  我这里有配方  如果真的需要联系我传给你啊
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好好做实验！
13楼2011-11-04 10:16:11
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水红蓝调

新虫 (小有名气)
楼上的热心童鞋们，我觉得DNS法还是不太实用。。希望大家帮忙另想想办法，，生物传感分析仪我们这里么有。。
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14楼2011-11-04 10:19:45
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loganfan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
scelab(金币+2): 貌似比较好用啊 2011-11-04 23:50:14
告诉你一个既简单又使用的方法-----买个血糖仪，很实用，我们就是这么做的。
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15楼2011-11-04 19:33:35
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lovehejuhua

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们实验室用的也是SBA生物传感分析仪，挺方便的，就是测的组数多了会不准，可能是膜该换了。。。
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Courage is not the absence of fear...
16楼2011-11-04 23:18:49
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jylichn

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
scelab(金币+4): 谢谢交流 2011-11-06 02:02:48
不太确定有几位提到DNS法的朋友，是不是自己真正用DNS法测过发酵液中的还原糖？
根据我对还原糖多年来，多种方法的比较，DNS法测复杂体系中还原糖是最不靠谱的一个方法，当然菲林试剂法也不行。
有人提到试剂盒，是个不错的方法，那当然还有最简单的方法，就用糖尿病人用的血糖计，只是结果偏差稍大了点，不知道你要求高不高
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17楼2011-11-05 10:30:10
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毛桃就是我

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+6): 鼓励新虫~~~谢谢交流 2011-11-06 02:03:35
1 葡萄糖测定
（1）1mg/mL 葡萄糖标准液
小烧杯取分析纯葡萄糖置于烘干箱中烘干至，于分析天平中准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖10mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到10mL 容量瓶中，用蒸馏水定容至10mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。
（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂
将 6.3g DNS （分析天平中称取于小烧杯）和262mL 2M NaOH 溶液（大量筒称取250ml+小量筒称取12ml），加到500mL（量杯量取） 含有185g 酒石酸钾钠的热水溶液中（在微波炉中加热1min溶解），再加5g 结晶酚和5g 亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。

1． 制作葡萄糖标准曲线
取 7 支10mL 具塞刻度试管编号，按表1分别加入浓度为1mg/mL 的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，配成不同葡萄糖含量的反应液。

        1mg/ml葡萄糖标准溶液   蒸馏水      DNS      葡萄糖含量      光密度值
管号           （ml）            （ml）     （ml）       （mg/ml）       （OD540）
0              0                 1          0.75         0
1              0.1               0.9        0.75         0.01
2              0.2               0.8        0.75         0.02
3              0.3               0.7        0.75         0.03
4              0.4               0.6        0.75         0.04
5              0.5               0.5        0.75         0.05
6              0.6               0.4        0.75         0.06

将各管摇匀，取试管架置于水浴锅中，在沸水浴中准确加热5min，取出，冷却至室温，用蒸馏水定容至10mL，加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色（分光光度计预热20分钟）。调波长540nm，用0 号管调零点，测出1~6号管的光密度值。以光密度值为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。
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木有签名呀！
18楼2011-11-05 14:39:30
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

★ ★ ★
scelab(金币+3): 谢谢热心回复 2011-11-06 02:03:16
引用回帖:
1楼: Originally posted by 水红蓝调 at 2011-11-03 09:37:47:
我在大肠杆菌的培养中用葡萄糖做碳源，然后想测定一下葡萄糖的残量，有没有相关童鞋测定过的？寻求比较简单方便的办法。。之前看的文献中的使用仪器都太复杂了。。。

太太太太太太。。。简单了。
只要你有水浴锅和光度计。

南京建成 有葡萄糖试剂盒。样品离心后，上清用加10或20 uL测糖。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
19楼2011-11-06 00:51:04
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lbingcom

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
山东科学院产双功能分析直接测葡萄糖就可以了
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20楼2012-01-27 17:09:23
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