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Samfain

金虫 (正式写手)

[求助] 如何分离乳酸菌细胞壁

求组,哪位高人知道如何分离乳酸菌细胞壁,并不完全破坏细胞壁!求指点!!!!!!!!!!!非常感激。。。。。。
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我117623326

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Samfain(金币+5): 好专业啊,有简单的方法吗?需要得到细胞壁。谢谢! 2011-11-08 18:46:35
用50mM Tris-HCL缓冲液(pH 7.8)悬浮菌体,进行超声波破碎,细胞浓度为0.06g/ml,破碎功率330W,工作215次(工作时间3s,间隔时间5s),离心取上清液即为粗酶液。60%硫酸铵沉淀,Sephacryl S-300 HR凝胶层析,Native-PAGE割胶回收纯化了发酵乳杆菌的CEP,用纯化的CEP 酶解脱脂乳,酶解液ACE抑制率为50% 。SDS-PAGE检测CEP分子量为32.5kDa,最适酶反应温度为41℃,最适酶反应pH为8.0。Mg2+,Co2+,Ca2+对CEP活性有激活作用;Zn2+, Ni2+,PMSF,EDTA对CEP活性有抑制作用
Holdon!
2楼2011-11-07 19:42:43
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