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如何分离乳酸菌细胞壁
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求组，哪位高人知道如何分离乳酸菌细胞壁，并不完全破坏细胞壁！求指点！！！！！！！！！！！非常感激。。。。。。 |
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【答案】应助回帖
Samfain(金币+5): 好专业啊，有简单的方法吗？需要得到细胞壁。谢谢! 2011-11-08 18:46:35
| 用50mM Tris-HCL缓冲液(pH 7.8)悬浮菌体，进行超声波破碎，细胞浓度为0.06g/ml，破碎功率330W，工作215次(工作时间3s，间隔时间5s)，离心取上清液即为粗酶液。60%硫酸铵沉淀，Sephacryl S-300 HR凝胶层析，Native-PAGE割胶回收纯化了发酵乳杆菌的CEP，用纯化的CEP 酶解脱脂乳，酶解液ACE抑制率为50% 。SDS-PAGE检测CEP分子量为32.5kDa，最适酶反应温度为41℃，最适酶反应pH为8.0。Mg2+，Co2+，Ca2+对CEP活性有激活作用；Zn2+, Ni2+，PMSF，EDTA对CEP活性有抑制作用 |
2楼2011-11-07 19:42:43