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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA电泳样品都留在孔内
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youngker918

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by illcf_11 at 2011-10-27 15:17:39:
如果产物没有扩出来，不至于连引物二聚体的条带都没有吧？

不一定哦！如果引物加得少也不会有引物二聚体的
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天才就怕不够天才，坏又不够坏，天天都想离开，却不知何处才能换骨脱胎
11楼2011-10-27 17:49:32
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yunzhifei

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking(金币+4): 鼓励发帖交流！ 2011-10-27 20:47:23
看你中间有一跑开的条带像是Marker，若是这样就不是胶的问题。看你照片建议你换缓冲液试试，有可能是你的TAE时间太长，另外160bp很小的，建议你电压放低点（80V即可），时间也不要太长，20分钟差不多，不过看你照片最大可能还是PCR没扩出来，胶孔里很像模板
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12楼2011-10-27 18:11:21
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xiaoche

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感觉是没有P出东西呢，重新P吧。160bp跑4%的胶很正常，经常跑
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13楼2011-10-27 22:20:25
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hyp862801

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励应助 2011-10-28 17:08:53
之前我也跑过一次这样的，4%的琼脂糖，样品含有酶和SG染色剂，结果就没有跑动，都停留在进样口。
后来减低了琼脂糖的浓度并且将染样换成了染胶，就ok了
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14楼2011-10-28 09:55:45
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54maozhu

铜虫 (初入文坛)
★
西瓜(金币+1): 感谢反馈 2011-10-28 17:09:02
感谢大家的帮忙，我已经解决了。是上样buffer的问题。
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15楼2011-10-28 10:40:39
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xiongxiong5900

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 欢迎交流。有蛋白的话会留在孔里，也会亮的。 2011-10-28 17:10:00
看marker的情况，琼脂糖胶溶的不够充分
160bp，建议用2%的胶
胶的浓度越大越难溶，微波炉调高火，五分钟（观察胶不要从三角瓶扑出，如扑出将活力降低，时间加长）
产物不出孔，有可能是其中有蛋白
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16楼2011-10-28 11:06:21
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再汉陈汤

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 54maozhu at 2011-10-28 10:40:39
感谢大家的帮忙，我已经解决了。是上样buffer的问题。

是loading buffer的问题吗？
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17楼2013-12-16 20:09:08
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