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youngker918

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by illcf_11 at 2011-10-27 15:17:39:
如果产物没有扩出来,不至于连引物二聚体的条带都没有吧?

不一定哦!如果引物加得少也不会有引物二聚体的
天才就怕不够天才,坏又不够坏,天天都想离开,却不知何处才能换骨脱胎
11楼2011-10-27 17:49:32
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yunzhifei

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking(金币+4): 鼓励发帖交流! 2011-10-27 20:47:23
看你中间有一跑开的条带像是Marker,若是这样就不是胶的问题。看你照片建议你换缓冲液试试,有可能是你的TAE时间太长,另外160bp很小的,建议你电压放低点(80V即可),时间也不要太长,20分钟差不多,不过看你照片最大可能还是PCR没扩出来,胶孔里很像模板
12楼2011-10-27 18:11:21
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xiaoche

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感觉是没有P出东西呢,重新P吧。160bp跑4%的胶很正常,经常跑
13楼2011-10-27 22:20:25
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hyp862801

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励应助 2011-10-28 17:08:53
之前我也跑过一次这样的,4%的琼脂糖,样品含有酶和SG染色剂,结果就没有跑动,都停留在进样口。
后来减低了琼脂糖的浓度并且将染样换成了染胶,就ok了
14楼2011-10-28 09:55:45
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54maozhu

铜虫 (初入文坛)


西瓜(金币+1): 感谢反馈 2011-10-28 17:09:02
感谢大家的帮忙,我已经解决了。是上样buffer的问题。
15楼2011-10-28 10:40:39
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xiongxiong5900

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 欢迎交流。有蛋白的话会留在孔里,也会亮的。 2011-10-28 17:10:00
看marker的情况,琼脂糖胶溶的不够充分
160bp,建议用2%的胶
胶的浓度越大越难溶,微波炉调高火,五分钟(观察胶不要从三角瓶扑出,如扑出将活力降低,时间加长)
产物不出孔,有可能是其中有蛋白
16楼2011-10-28 11:06:21
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再汉陈汤

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 54maozhu at 2011-10-28 10:40:39
感谢大家的帮忙,我已经解决了。是上样buffer的问题。

是loading buffer的问题吗?
17楼2013-12-16 20:09:08
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