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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA电泳样品都留在孔内
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54maozhu

铜虫 (初入文坛)

[求助] DNA电泳样品都留在孔内

求助高手，PCR产物电泳样品都留在孔内，没有条带。1.5%琼脂糖，1乘的TAE。PCR产物理论长度160bp。
为便于交流，以图片形式直接上传！



[ Last edited by wanhscn on 2011-10-27 at 10:39 ]
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1楼 2011-10-27 10:07:46
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xiongxiong5900

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 欢迎交流。有蛋白的话会留在孔里，也会亮的。 2011-10-28 17:10:00
看marker的情况，琼脂糖胶溶的不够充分
160bp，建议用2%的胶
胶的浓度越大越难溶，微波炉调高火，五分钟（观察胶不要从三角瓶扑出，如扑出将活力降低，时间加长）
产物不出孔，有可能是其中有蛋白
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16楼2011-10-28 11:06:21
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考研生涯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

会不会是琼脂糖浓度太高，一般就是0.8—1左右吧
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2楼2011-10-27 11:11:21
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illcf_11

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-27 20:46:50
54maozhu(金币+6): 2011-11-03 16:50:10
感觉像是PCR没有进行过，目的片段160bp，琼脂糖1.5%是没有问题的。另外，如果你还有样品，建议你是不是再跑一次，但在跑开1cm的样子就提早拍个照看看。本人出现过，跑的短条带在，跑开了，条带失踪的情况
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3楼2011-10-27 11:19:00
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另一个天堂

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-27 20:46:56
首先，你跑了多长时间，电压多大？
如果都没问题，那就是你的PCR产物的问题。还有留在孔洋的不一定是PCR产物
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4楼2011-10-27 11:50:58
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