24小时热门版块排行榜    

查看: 1862  |  回复: 22

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

oceanworld(金币+2): 2011-12-27 08:18:50
引用回帖:
10楼: Originally posted by liuzhan2705 at 2011-12-19 20:05:37:
您好!想向您请教一下脉冲场电泳的问题,我现在在做脉冲场电泳,可是自己做的胶块每次都切不开?条带要么在孔里,要么整个通道都是拖尾现象~请问这是怎么回事?在制作过程中有什么特别注意事项吗、?不胜感激~

不知道你胶浓度是多少的,多少电压,多长时间
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
11楼2011-12-19 20:07:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhan2705

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by brightfuture01 at 2011-12-19 20:07:25:
不知道你胶浓度是多少的,多少电压,多长时间

1%的LMP,电压是6V,电泳时间为15小时,分离片段大小约为130Kb
12楼2011-12-19 20:36:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by liuzhan2705 at 2011-12-19 20:36:13:
1%的LMP,电压是6V,电泳时间为15小时,分离片段大小约为130Kb

这个电压偏小了。。。。。。。。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
13楼2011-12-19 20:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhan2705

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by brightfuture01 at 2011-12-19 20:42:45:
这个电压偏小了。。。。。。。。

是吗?可是Marker跑的挺好的啊~
请问起始转换时间和最终转换时间是啥意思?
14楼2011-12-19 20:47:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

引用回帖:
14楼: Originally posted by liuzhan2705 at 2011-12-19 20:47:41:
是吗?可是Marker跑的挺好的啊~
请问起始转换时间和最终转换时间是啥意思?

你跑了半天脉冲场你不知道脉冲场的原理么?
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
15楼2011-12-19 20:51:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

你用的什么marker?
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
16楼2011-12-19 20:53:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhan2705

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
16楼: Originally posted by brightfuture01 at 2011-12-19 20:53:00:
你用的什么marker?

大致的原理懂~就是这俩名词跟实际没联系起来~我用的是NEB的marker,最大分子量为190Kb
17楼2011-12-19 21:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by liuzhan2705 at 2011-12-19 21:01:16:
大致的原理懂~就是这俩名词跟实际没联系起来~我用的是NEB的marker,最大分子量为190Kb

整个泳道拖尾就对了,孔里面跑不出来的多为过大的DNA或者是其他杂质。

脉冲场电泳时方向是变化的,你好好看看原理吧。+60度角跑一定时间,-60度角跑一定时间,这样才会使得分辨率更高。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
18楼2011-12-19 21:06:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浅歌99

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by liuzhan2705 at 2011-12-19 20:05:37
您好!想向您请教一下脉冲场电泳的问题,我现在在做脉冲场电泳,可是自己做的胶块每次都切不开?条带要么在孔里,要么整个通道都是拖尾现象~请问这是怎么回事?在制作过程中有什么特别注意事项吗、?不胜感激~...

楼主你好,我现在也在做BAC ,同样出现了包埋块酶切切不动的情况,请问您当时是怎么解决的啊?
19楼2013-11-28 14:36:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhan2705

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 浅歌99 at 2013-11-28 14:36:46
楼主你好,我现在也在做BAC ,同样出现了包埋块酶切切不动的情况,请问您当时是怎么解决的啊?...

应该不是不动,而是应该有拖尾吧?这很正常,由于随机切出来的条带大小不一,所以条带总会有拖尾,可以尝试酶切时将包埋块切成25个小碎块进行部分酶切
20楼2013-11-30 22:04:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 oceanworld 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-21 6/300 2026-03-22 11:35 by plum李子
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +5 张vvvv 2026-03-15 7/350 2026-03-21 19:23 by ColorlessPI
[考研] 工科0856求调剂 +3 沐析汀汀 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:30 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +6 怀瑾握瑜l 2026-03-20 6/300 2026-03-20 20:30 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
信息提示
请填处理意见