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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 应助虫友 real-gold 的关于 琼脂糖 6倍loading buffer
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

[交流] 应助虫友 real-gold 的关于 琼脂糖 6倍loading buffer 已有3人参与

你好，向你请教一个自制marker的问题，酶切好之后，一般marker里是要加入含溴酚蓝之类的指示剂或助沉剂，在论坛上看到你是加入loading buffer和EDTA，想问一下你加入的loading buffer和EDTA的比例是怎样的？谢谢

10xNEB （10L）
Tris 1201g；EDTA 33.6g；NaAc 102.5g；HAc 275-350ml 至PH=8.1
6xLoading B （100ml）
Glycerol 70ml；10xNEB 5ml；0.25M EDTA 8ml；ddH2O 10ml；20%SDS 1ml；1% Bromphenol Blue 6ml （less BPB when for a darker color）

EDTA final cons 20mM

其它虫友可补充其他方法！

[ Last edited by wanhscn on 2011-10-24 at 16:27 ]
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real-gold

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真相是最大的奢侈品
1楼 2011-10-24 16:21:56
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
西瓜:编辑内容 2011-10-24 17:29
引用回帖:
2楼: Originally posted by wxq999 at 2011-10-24 16:50:01:
-------------广告内容--------------------

有较大的广告嫌疑！版规规定！没有办法！请到广告区付费发帖！

[ Last edited by 西瓜 on 2011-10-24 at 17:29 ]
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真相是最大的奢侈品
3楼2011-10-24 17:09:30
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wxq999

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜:编辑内容 2011-10-24 17:29
西瓜(金币-10): 2011-10-24 17:29:13
-------------广告内容--------------------

[ Last edited by 西瓜 on 2011-10-24 at 17:29 ]
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-10-24 16:50:01
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real-gold

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
敢问以上配方有出处否？
请教最终是加入该6Xloading buffer使loading buffer终浓度为1X吧？
再请教大家marker的有效期、稳定性主要是受自身片段的性质还是受保存的buffer影响大一点？发现国内的一些产家的marker降解的很快，而国外的产品不怎么容易降解，放在室温4-5个月好好的。

[ Last edited by real-gold on 2011-10-24 at 21:01 ]
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4楼2011-10-24 20:49:39
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★
西瓜(金币+1): 热心啊 2011-10-25 17:26:28
引用回帖:
4楼: Originally posted by real-gold at 2011-10-24 20:49:39:
敢问以上配方有出处否？
请教最终是加入该6Xloading buffer使loading buffer终浓度为1X吧？

本实验室protocol
配的是6xloading buffer，最终是加入该6Xloading buffer使loading buffer终浓度为1X的
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真相是最大的奢侈品
5楼2011-10-24 20:52:08
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