| 查看: 3496 | 回复: 9 | |||||
[交流]
细菌的培养 已有9人参与
|
|
一般的细菌都可以用人工的方法进行培养，以研究它们的各种生物学特征或制备菌苗。培养细菌时，除采用合适的培养基外，还要供给一些必要的培养条件，如温度、气体等。 1. 进行活化的话是用斜面好还是放液体培养基摇瓶好呢？保藏的话用多少浓度的甘油？ 1.1 斜面和平板活化与液体活化都可以，斜面较好，但液体活化如果时间控制得好，不会造成传代多的现象。 1.2 基因工程酵母的保存方法：与野生菌一样，要用甘油保藏的话，最好是在对数期，一般摇床培养20小时左右，过夜培养后保藏就可以。可将酵母菌在液体培养基培养3~5天，然后与100%甘油1：1混合冻存即可.即甘油浓度50%。 2. 菌体不生长 2.1 先查培养条件。温度很关键， 校正一下温度计是否正常指示；还要其他条件（湿度，摇床转速等）。 2.2 查原材料。尤其是原材料的保存问题，最好在4度冷藏。 2.3 查菌种 2.4 如果长得慢，加大接种量看一下。 2.5 消毒有没有问题 3.为什么会发生菌体自溶？发生菌体自溶会让发酵参数发生什么变化 自溶和培养条件有关系，比如PH突然变化会引起菌体渗透压的变化导致自溶，还有温度的影响等；一般来说菌体也有自己的生存时限（依培养物变化而变化），也会产生自溶。 3.1 控制条件不好，PH和温度不适合溶氧太低使菌体生长异常，产生溶菌酶自溶； 3.2 营养条件不好，营养跟不上，碳源不足自溶； 3.3 菌体衰老自溶，菌种培养时间过长，造成老化。改换酵母粉，增加一些生物素及微量元素可以消除自溶的问题； 3.4 过早的表达产物往往会对细胞产生毒害作用，使宿主菌的比生长速率下降甚至使细胞死亡、自溶； 3.5 感染噬菌体 发生菌体自溶现象：pH升高，溶氧升高，氨氮回升，镜检时菌体空、碎 4. 培养基组分对芽孢杆菌产生芽孢的影响 一般加入Mn离子有助芽孢形成，另外培养基中注意磷酸盐含量不要太高了，高了不利于形成芽孢的。Mn的浓度大概在5-50ppm之间。 5. 质粒小量提取之细菌的培养及收集 将含有质粒菌种接种在LB固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24h。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12小时至对数生长后期。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 学习园地 | 淘贴分享 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
dasheng1980» 猜你喜欢
307分材料专业求调剂
已经有6人回复
-
材料专硕283求调剂
已经有14人回复
-
327求调剂
已经有3人回复
-
计算机11408，286分求调剂
已经有6人回复
-
材料调剂
已经有14人回复
-
一志愿南昌大学，085600，344分求调剂
已经有3人回复
-
考研调剂生寻找导师
已经有3人回复
-
材料0856 英一数二 323 求调剂
已经有14人回复
-
308求调剂
已经有5人回复
-
化学0703-一志愿211-338分求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
yc652090251
金虫 (小有名气)
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 2813.2
- 散金: 4
- 红花: 1
- 帖子: 195
- 在线: 118.1小时
- 虫号: 1408852
- 注册: 2011-09-20
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2011-10-16 20:58:29
xiaojiancai
木虫 (著名写手)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 1998.2
- 散金: 100
- 红花: 1
- 帖子: 1287
- 在线: 308.9小时
- 虫号: 218518
- 注册: 2006-03-13
- 性别: GG
- 专业: 土壤生态学
3楼2011-10-17 08:51:46
hopebiolqdhb
金虫 (著名写手)
- MicEPI: 1
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 4136.8
- 散金: 10
- 红花: 8
- 帖子: 1641
- 在线: 270.5小时
- 虫号: 1027227
- 注册: 2010-05-24
- 专业: 食品卫生
4楼2011-10-17 10:48:51
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
|
本帖内容被屏蔽 |
5楼2011-10-17 13:53:19
dasheng1980
铁杆木虫 (知名作家)
大圣
- 应助: 64 (初中生)
- 金币: 7702.4
- 红花: 3
- 沙发: 7
- 帖子: 8882
- 在线: 412.8小时
- 虫号: 1363851
- 注册: 2011-08-09
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2011-10-17 13:56:07
 |
7楼2011-11-23 15:15:48
liuxin1989
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 256.9
- 帖子: 17
- 在线: 11.7小时
- 虫号: 1462151
- 注册: 2011-10-26
- 专业: 微生物生理与生物化学
8楼2011-11-24 10:26:00
9楼2018-08-09 14:54:05
10楼2018-08-10 22:48:06
