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小欣1211

金虫 (小有名气)

[求助] 薄层色谱为什么没有点

我的样品是过大孔树脂20%乙醇洗下来的,可是在做薄层色谱的时候,那个点样的点还在那,上面一个点都没有,开始用石油醚乙酸乙酯,石油醚丙酮,氯仿甲醇,后来我以为是极性太小,就换了甲醇水,可是结果还是一样,显色剂是10%硫酸乙醇,哪位大侠知道是什么原因呢,是样品浓度问题还是展开剂极性问题呢?

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呵呵~~
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zlong2008

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
qinhy(金币+1): 回帖奖励~ 2011-10-15 18:47:58
既然展开剂都试了(20%洗脱下来的成分应该极性较大吧),应该是样品浓度的问题,我点样一般都浓缩到0.1毫升。
在压力中前进
2楼2011-10-15 14:24:04
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zlong2008 at 2011-10-15 14:24:04:
既然展开剂都试了(20%洗脱下来的成分应该极性较大吧),应该是样品浓度的问题,我点样一般都浓缩到0.1毫升。

浓缩到0.1毫升?那点样应该点多少呢?
呵呵~~
3楼2011-10-15 14:41:06
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yumulin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-10-16 23:20:46
1、可能是没有显色出来,加大点样浓度或多尝试几种显色剂,你想分离的是什么类型的物质啊,香草醛,荧光,多种显色途径尝试一下
2、如果你怀疑是展开剂的问题,那么可以从最初单一的展开体系开始,比如纯甲醇,然后配比其他溶剂
4楼2011-10-15 14:45:06
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yumulin at 2011-10-15 14:45:06:
1、可能是没有显色出来,加大点样浓度或多尝试几种显色剂,你想分离的是什么类型的物质啊,香草醛,荧光,多种显色途径尝试一下
2、如果你怀疑是展开剂的问题,那么可以从最初单一的展开体系开始,比如纯甲醇,然 ...

我做的黄酮,我看文献上也有用氢氧化钠显色的,可是硫酸不是通用的么,而且那个点样的点还能看见,就没动,所以我觉得应该是展开剂的问题,是不是极性小呢?还是样品浓度或者点样太多或者太少?
呵呵~~
5楼2011-10-15 15:01:34
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zlong2008

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小欣1211 at 2011-10-15 14:41:06:
浓缩到0.1毫升?那点样应该点多少呢?

我一般都是用毛细管取样的,15-20cm。将近3-5微升
在压力中前进
6楼2011-10-15 15:28:45
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melodygone

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

点都没动,应该是样品或是展开剂问题吧。
态度决定高度
7楼2011-10-15 21:48:15
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myvigor

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 3Q 2011-10-16 23:21:13
20%的乙醇洗脱部位极性太大了,你用的展开剂极性一般都不合适,试用下BWM系统,或者换换你的板,用反相板试试可能展开。
8楼2011-10-16 12:04:01
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by myvigor at 2011-10-16 12:04:01:
20%的乙醇洗脱部位极性太大了,你用的展开剂极性一般都不合适,试用下BWM系统,或者换换你的板,用反相板试试可能展开。

我是新手,不知道你说的那个系统,能不能具体点,还有那个反相板,谢谢啦
呵呵~~
9楼2011-10-16 13:11:28
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yumulin

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢回帖! 2011-10-16 23:22:10
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小欣1211 at 2011-10-15 15:01:34:
我做的黄酮,我看文献上也有用氢氧化钠显色的,可是硫酸不是通用的么,而且那个点样的点还能看见,就没动,所以我觉得应该是展开剂的问题,是不是极性小呢?还是样品浓度或者点样太多或者太少?

点样太多的话起码会有拖尾,首先确定你的提取液中确实含有你的目标成分,如果确定有的话,再从展开和显色考虑。显色剂的制备应该没有问题吧,现用现配?
10楼2011-10-16 19:06:52
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